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文檔簡介
1、壬基酚(NonylPhenol,NP)做為一種重要的環(huán)境激素,其對(duì)環(huán)境及人體的危害已經(jīng)引起人們的注意。一些研究者已開始測定環(huán)境以及生物體中NP的含量,并開始了NP毒性的研究,但關(guān)于環(huán)境中NP的消除,尤其是生物降解這一去除NP的有效方式的研究卻較少。本課題實(shí)驗(yàn)就是對(duì)壬基酚的生物降解進(jìn)行初步研究。 通過在壬基酚聚氧乙烯醚和NP含量比較大的水環(huán)境中取樣,回到實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)馴化,分離出了具有耐酚性并具有一定降解NP性能的菌種。采用革蘭氏染
2、色法確定菌種的革蘭氏染色性質(zhì),然后對(duì)降解效果最好的菌株B—01進(jìn)行16S rDNA序列分析,鑒定出得到的菌株是惡臭假單胞菌(pseudomonas putida)。 在分離純化出菌種以后,做了菌種對(duì)NP的降解效果的實(shí)驗(yàn),以及菌種的生長曲線。根據(jù)菌種的生長曲線,在對(duì)數(shù)生長期進(jìn)行NP降解條件優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)。本實(shí)驗(yàn)借助于正交試驗(yàn),主要考慮了溫度、pH值、時(shí)間、濃度對(duì)菌種降解NP的影響,通過計(jì)算在不同條件下的降解率,尋找降解NP的最佳條件
3、。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,對(duì)于肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)出來的菌種B—01,在30℃、pH值為7.0,降解時(shí)間為26h,培養(yǎng)基中NP濃度為26.91860ng/μL(26.91860mg/L)時(shí)降解效果最好,降解率可達(dá)68.32%。對(duì)于尿素培養(yǎng)基培養(yǎng)出來的菌種B—03,降解的最優(yōu)條件:溫度20℃,pH值為7.0,培養(yǎng)時(shí)間為26h,培養(yǎng)基中NP濃度為5.15987ng/μL(5.15987mg/L)時(shí)降解效果最好,降解率可達(dá)55.28%。 通過GC
4、—MS檢測,在最佳降解條件下,惡臭假單胞菌降解NP后的產(chǎn)物為辛基酚和戊基酚,由此推斷出生物降解NP的機(jī)理可能為烷基鏈的斷裂先于苯環(huán)的斷裂,NP先斷掉一個(gè)末端碳,成為辛基酚,然后再去掉其它碳,變成戊基酚。 最后進(jìn)行了惡臭假單胞菌的初步應(yīng)用研究。考察了光照對(duì)于惡臭假單胞菌降解NP的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)當(dāng)存在光照時(shí),NP的降解率較高。在菌株對(duì)于模擬廢水的處理效果的研究中,發(fā)現(xiàn)菌種在接近實(shí)際污水水質(zhì)的條件下,對(duì)NP的降解效果良好,而且對(duì)CO
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