EB病毒感染對microRNA-203的表達(dá)影響及其相互作用是鼻咽癌發(fā)病學(xué)的重要機(jī)制.pdf

1、中南大學(xué)博士學(xué)位論文EB病毒感染對micrNA203的表達(dá)影響及其相互作用是鼻咽癌發(fā)病學(xué)的重要機(jī)制姓名：俞海波申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：李桂源；盧建紅20120603博士學(xué)位論文中文摘要[miR203調(diào)控新靶基因E2F3、CCNGl參與抑制上皮細(xì)胞的生長和惡性轉(zhuǎn)化能力】通過miRBase軟件分析差異表達(dá)miRNA分子的基本信息，在線miRNA靶基因預(yù)測軟件targetscan和miRanda對下游靶基因進(jìn)行分析

2、，并利用熒光素報(bào)告載體活性檢測實(shí)驗(yàn)證實(shí)E2F3和CCNGl是miR203的直接調(diào)控的新靶基因。RTPCR和Westemblot結(jié)果顯示miR203可以在mRNA和蛋白質(zhì)水平調(diào)控靶基因的表達(dá)。MTT和流式細(xì)胞結(jié)果表明miR203具有抑制上皮細(xì)胞生長能力，能抑制細(xì)胞從GO／G1期向S期轉(zhuǎn)換的進(jìn)程；miR203明顯抑制裸鼠移植瘤腫瘤細(xì)胞的生長。免疫組化和原為雜交結(jié)果顯示miR203過表達(dá)的裸鼠瘤組織中靶基因E2F3和CCNGl表達(dá)下調(diào)。在上皮

3、細(xì)胞中過表達(dá)靶基因E2F3和CCNGl能夠逆轉(zhuǎn)miR203對上皮細(xì)胞生物學(xué)功能的影響?！綥MPl是EB、下調(diào)miR203的關(guān)鍵病毒蛋白，并且通過激活JNK和NFKB信號通路調(diào)控miR203的表達(dá)】潛伏膜蛋白LMPl和LMP2是EBV編碼的重要癌蛋白。qRTPCR結(jié)果證實(shí)EBV通過LMPl參與調(diào)控PrimiR203和MaturemiR203表達(dá)下調(diào)而LMP2卻無此功能；在EBV和LMPl穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的上皮細(xì)胞中沉默LMPl表達(dá)后，miR203