病毒與鼻咽癌、喉癌發(fā)病關(guān)系的研究.pdf

1、大連醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文病毒與鼻咽癌、喉癌發(fā)病關(guān)系的研究姓名：崔萬明申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：呂申20050701本研究針對上述問題，以中國北方大連地區(qū)的鼻嗍癌、喉癌患者的腫瘤組織為研究對象，綜合分析2種惡性腫瘤發(fā)生與EBV、HPV病毒感染的關(guān)系及不同病毒感染對抑癌基因p53及PCNA表達(dá)的影響，探討兩種病毒感染對鼻咽癌、喉癌的致瘤機(jī)制。希望能為鼻咽癌、喉癌的預(yù)警和盡早有效治療提供一些幫助。目的：檢測鼻咽癌、喉

2、癌組織EBV、HPV感染、突變型P53蛋白及PCNA表達(dá)情況，探討鼻咽癌、喉癌發(fā)生與HPV、EBV感染的關(guān)系及鼻咽癌、喉癌發(fā)病的病毒學(xué)分子生物機(jī)制，為臨床預(yù)警、早期診斷、早期治療和預(yù)后判斷提供理論依據(jù)。此外，探討自制組織芯片用于免疫組織化學(xué)、原位雜交法等蛋白、核酸組織原位檢測的可行性。方法：對大連醫(yī)科大學(xué)附屬一院病理科存檔的1997一1998年間活檢鼻咽癌組織標(biāo)本47例，均為低分化或未分化鱗狀細(xì)胞癌：1997—1998年間手術(shù)切除臨床病

3、理資料完整的58例喉癌病理標(biāo)本，均為鱗狀細(xì)胞癌；所有病例提供者術(shù)前均未接受任何放療與化療。標(biāo)本經(jīng)常規(guī)石蠟包埋并制成普通組織切片，HE染色，光鏡下鏡檢，確定病理診斷及取材部位。用自行發(fā)明、研制的便攜式組織點(diǎn)樣儀、磁性平臺組織點(diǎn)樣儀制做組織芯片，DNA原位雜交法檢測腫瘤組織HPv—DNA，RNA原位雜交法檢測腫瘤組織EBVRNA(EBER)：免疫組織化學(xué)法檢測HPV、EBV病毒蛋白及突變型P53蛋白、PCNA表達(dá)情況。對比觀察鼻咽癌、喉癌的

4、HPV、EBV兩種病毒感染的頻度及兩種病毒蛋白、突變型P53蛋白、PCNA的表達(dá)差異。同時(shí)，收集頭頸部惡性淋巴瘤(46例)、宮頸癌(117例)常規(guī)石蠟標(biāo)本，用相同的方法制成不同容量、不同芯點(diǎn)直徑、不同間距的組織芯片，比較在HE染色、免疫組織化學(xué)染色、原位雜交染色時(shí)自制組織芯片與普通石蠟切片的脫片率和染色質(zhì)量，確定自制芯片用于高通量篩選組織蛋白和核酸表達(dá)信息的可行性。應(yīng)用SPSSll0統(tǒng)計(jì)軟件，以X2檢驗(yàn)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。差異顯著