從菠蘿廢棄物分離提取菠蘿蛋白酶的研究.pdf

1、本文主要研究了以菠蘿加工廢棄物菠蘿皮為主要原料，分離提取菠蘿蛋白酶的工藝。
　　 采用F．I．P法檢測(cè)浸提液中菠蘿蛋白酶活性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明F．I．P法檢測(cè)浸提液中菠蘿蛋白酶酶活是可行的，加標(biāo)回收率在95％-98％之間。
　　 為了防止菠蘿蛋白酶生產(chǎn)過(guò)程中失活，以菠蘿皮和莖的提取液為對(duì)象，研究了溫度及停留時(shí)間、pH值、金屬離子種類(lèi)和濃度、多元醇和糖等因素對(duì)浸提液中菠蘿蛋白酶活性的影響。在實(shí)驗(yàn)范圍內(nèi)，溫度超過(guò)50℃時(shí)菠蘿皮和

2、莖的浸取液中菠蘿蛋白酶將明顯失活，在浸提液原始（生理）pH條件下，浸提液中菠蘿蛋白酶穩(wěn)定性最好；Fe3+、Fe2+、Cu2+等金屬離子都使菠蘿皮浸提液中菠蘿蛋白酶穩(wěn)定性下降，F(xiàn)e3+的影響最大；Ca2+含量在20mg·L-1-40 mg·L-1時(shí)，可提高菠蘿皮浸提液中菠蘿蛋白酶的穩(wěn)定性，甘油和葡萄糖可明顯提高菠蘿皮浸提液中菠蘿蛋白酶的穩(wěn)定性。
　　 研究了用硫酸銨從菠蘿皮浸提液中析出菠蘿蛋白酶的影響因素。不同pH值下，鹽濃度對(duì)菠

3、蘿皮浸提液中菠蘿蛋白酶酶活沉降率的影響的研究得出，酶活沉降率在pH3.87，鹽濃度為0.3 g·mL-1時(shí)達(dá)到最大值。對(duì)不同鹽濃度下菠蘿蛋白酶單位酶活變化對(duì)酶活沉降率的影響的研究表明，隨菠蘿蛋白酶單位酶活的增加，酶活沉降率先增大后減小，在單位酶活達(dá)到52.95F．I．P-U·mL-1大時(shí)酶活沉降率達(dá)到最大值；在單位酶活較小時(shí)，鹽濃度為0.3g·mL-1的酶活沉降率大于鹽濃度為0.25 g·mL-1時(shí)的酶活沉降率；在單位酶活大于或等于52

4、.95 F．I．P-U·mL-1時(shí)，鹽濃度為0.25 g·mL-1的酶活沉降率大于0.3 g·mL-1時(shí)的酶活沉降率。鹽濃度對(duì)純化倍數(shù)影響的研究得出，隨鹽濃度的增大，純化倍數(shù)呈下降趨勢(shì)，在鹽濃度為0.2 g·mL-1時(shí)純化倍數(shù)為15.1，在0.25到0.35 g·mL-1趨于穩(wěn)定，為12.81左右，以后趨于遞減。
　　 研究了操作條件對(duì)菠蘿皮浸提液中菠蘿蛋白酶超濾過(guò)程中酶活截留率、滲透通量和濃縮倍數(shù)的影響，不同膜切割分子量下壓力

5、對(duì)滲透通量影響不同。膜切割分子量10 KD，30 KD在壓力0.38 MPa時(shí)滲透通量達(dá)到最大值，分別為4.4 L·m-2·h-1和7.7 L·m-2·h-1；100 KD時(shí)在壓力0.26 MPa時(shí)滲透通量達(dá)到最大值為8.4 L·m-2·h-1。pH值對(duì)菠蘿蛋白酶酶活截留率及滲透通量有影響，在pH3.87時(shí)滲透通量最高且為7.9 L·m-2·h-1。用100 KD的膜超濾102min后，酶活截留率呈一定速率下降，超濾濃縮倍數(shù)在2.07到