NF-κBP65及其相關(guān)調(diào)控基因在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及與臨床病理特點(diǎn)關(guān)系的研究.pdf

1、目的：NF-кB P65是一類(lèi)重要的細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子，它能調(diào)控許多下游基因的表達(dá)，涉及到細(xì)胞的粘附、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移等諸多方面。多項(xiàng)研究表明，NF-кB P65及其家族成員在許多人類(lèi)腫瘤中都顯示出高表達(dá)，而在中末分化的正常組織不表達(dá)或微弱表達(dá)。NF-кB P65的親腫瘤特性使其在探討腫瘤診治領(lǐng)域成為一個(gè)新的熱點(diǎn)。肺癌是在我國(guó)發(fā)病率較高的惡性腫瘤，其中70-80％為非小細(xì)胞肺癌，本研究采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)了NF-кB P65(核因子-кB P

2、65)及uPA(尿激酶纖溶酶原激活劑)、MMP9(基質(zhì)金屬蛋白酶9)、VEGF(血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子)在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)，并分析了NF-кBP65與它們之間的相關(guān)性，從而推測(cè)在非小細(xì)胞肺癌中是否通過(guò)NF-кB P65的激活來(lái)調(diào)控上述相關(guān)因子的表達(dá)，揭示NF-кB P65與上述因子的激活和表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌的臨床病理特點(diǎn)及其預(yù)后的關(guān)系；初步探討了NF-кB P65在非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生、發(fā)展及其浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移中的作用，以及在非小細(xì)胞肺癌的診斷、治

3、療及預(yù)后等方面可能的意義，以期對(duì)非小細(xì)胞肺癌的臨床診斷治療提供新的依據(jù)。 方法：選擇白求恩國(guó)際和平醫(yī)院病理科2004年1月-2006年5月間45例非小細(xì)胞肺癌術(shù)后存檔蠟塊，45例全部有完整的臨床資料，正常對(duì)照組為非小細(xì)胞肺癌患者手術(shù)切除癌組織標(biāo)本的切緣正常組織，距離腫瘤>5 cm，HE染色未發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞。將所有石蠟包埋標(biāo)本制片后，應(yīng)用免疫組織化學(xué)二步法測(cè)定了NF-кB P65、uPA、MMP9、VEGF四種蛋白的表達(dá)情況，并結(jié)合臨

4、床資料，對(duì)其進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。有關(guān)數(shù)據(jù)分別應(yīng)用SPSS 12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，半定量的等級(jí)資料用秩和檢驗(yàn)，兩組率或多組率的比較用x<'2>檢驗(yàn)，等級(jí)相關(guān)用Spearman等級(jí)相關(guān)檢驗(yàn)等統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，P<0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果：1.NF-кB P65在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及其與肺癌臨床病理特點(diǎn)的關(guān)系非小細(xì)胞肺癌組織、肺正常組織NF-кB P65陽(yáng)性表達(dá)率分別為66.67％(30/45)、13.33％(6/45)，經(jīng)秩和檢驗(yàn)

5、兩者有顯著性差異(Mann-Whitney U=422.500,WilcoxonW=1457.500，Z=-5.412，P=0.000)。NF-кB P65陽(yáng)性表達(dá)率水平與患者性別、年齡、腫瘤部位、組織學(xué)類(lèi)型均無(wú)相關(guān)性，經(jīng)x<'2>檢驗(yàn)P>0.05；而腫瘤長(zhǎng)徑≥5cm、分化程度低、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、病理分期在Ⅲ期以上的肺癌組織NF-кB P65陽(yáng)性表達(dá)率明顯增高，經(jīng)x<'2>檢驗(yàn)P<0.05。 2 uPA、MMP9、VEGF在非小細(xì)

6、胞肺癌組織中的表達(dá)及其與臨床病理特點(diǎn)的關(guān)系2.1 uPA在非小細(xì)胞肺癌組織、正常肺組織陽(yáng)性表達(dá)率分別為80.00％(36/45)、8.89％(4/45)，經(jīng)秩和檢驗(yàn)兩者有顯著性差異(Mann-Whitney U=263.000，Wilcoxon W=1298.000，Z=-6.689.P=0.000)。uPA在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤部位、組織學(xué)類(lèi)型、病理分期均無(wú)顯著相關(guān)性，經(jīng)x<'2>檢驗(yàn)P>0.05。而腫瘤長(zhǎng)徑

7、≥5cm、分化程度低、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺癌組織uPA陽(yáng)性表達(dá)率明顯增高，經(jīng)x<'2>檢驗(yàn)P<0.05。 2.2 MMP9在非小細(xì)胞肺癌組織、正常肺組織陽(yáng)性表達(dá)率分別為73.33％(33/45)、22.22％(10/45)，經(jīng)秩和檢驗(yàn)兩者有顯著性差異(Mann-Whitney U=465.500.Wilcoxon W=1500.500，Z=-4.802，P=0.000)。MMP9在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤部位

8、、組織學(xué)類(lèi)型均無(wú)顯著相關(guān)性，經(jīng)x<'2>檢驗(yàn)P>0.05。分化程度低、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、病理分期在Ⅲ期以上的肺癌組織MMP9陽(yáng)性表達(dá)率明顯增高，經(jīng)x<'2>檢驗(yàn)P<0.05。 2.3 VEGF在非小細(xì)胞肺癌組織、正常肺組織陽(yáng)性表達(dá)率分別為57.78％(26/45)、20.00％(9/45)，經(jīng)秩和檢驗(yàn)兩者有顯著性差異(Mann-Whitney U=590.500.Wilcoxon W=1625.500，Z=-3.896，P=0.00

9、0)。VEGF在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤部位、組織學(xué)類(lèi)型、病理分期均無(wú)顯著相關(guān)性，經(jīng)x<'2>檢驗(yàn)P>0.05。分化程度低、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺癌組織VEGF陽(yáng)性表達(dá)率明顯增高，經(jīng)x<'2>檢驗(yàn)P<0.05。 3 非小細(xì)胞肺癌組織中NF-кB P65與uPA、MMP9、VEGF表達(dá)的相關(guān)性 3.1 NF-кB P65和uPA在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)經(jīng)Spearman等級(jí)相關(guān)分析呈顯著正相關(guān)(rs

10、=0.951，P=0.049)。 3.2 NF-кB P65和MMP9在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)經(jīng)Spearman等級(jí)相關(guān)分析呈顯著正相關(guān)(rs=0.956，P=0.044)。 3.3 NF-кB P65和VEGF在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)經(jīng)Spearman等級(jí)相關(guān)分析呈顯著正相關(guān)(rs=0.951，P=0.049)。 結(jié)論： 1 NF-кB P65在正常肺組織中微弱表達(dá)，而在非小細(xì)胞肺癌中呈高表達(dá)。NF-кB

11、P65的陽(yáng)性表達(dá)率與性別、年齡、腫瘤部位、組織學(xué)類(lèi)型均無(wú)明顯相關(guān)性，而與腫瘤大小、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、病理分期均有相關(guān)性，說(shuō)明在惡性程度高、己發(fā)生轉(zhuǎn)移的肺癌組織中表達(dá)陽(yáng)性率高，提示NF-кB P65在非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生發(fā)展、浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移中可能起重要的作用，其表達(dá)水平對(duì)評(píng)價(jià)非小細(xì)胞肺癌的惡性程度有一定的參考價(jià)值。 2 uPA在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)水平比正常肺組織中明顯增高。陽(yáng)性表達(dá)率與患者年齡、性別、腫瘤部位、組織病理分型、TNM分

12、期無(wú)明顯相關(guān)性，而與腫瘤大小、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況有明顯相關(guān)性，說(shuō)明uPA在腫瘤有轉(zhuǎn)移且惡性程度高的組織中陽(yáng)性表達(dá)率增高，提示uPA在非小細(xì)胞肺癌的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移中可能起重要的作用。 3 MMP9在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)水平比正常肺組織中明顯增高。陽(yáng)性表達(dá)率與患者年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤部位、組織學(xué)類(lèi)型均無(wú)顯著相關(guān)性，與患者分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況、病理分期有關(guān)，說(shuō)明MMP9在腫瘤有轉(zhuǎn)移且惡性程度高的組織中陽(yáng)性表達(dá)率增高，提示MM

13、P9在非小細(xì)胞肺癌的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移中可能也起重要的作用。 4 VEGF在正常肺組織中微弱表達(dá)，而在非小細(xì)胞肺癌中呈高表達(dá)，在非小細(xì)胞肺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率與患者年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤部位、組織學(xué)類(lèi)型、病理分期均無(wú)顯著相關(guān)性，與患者分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況有關(guān)，說(shuō)明VEGF在腫瘤有轉(zhuǎn)移且惡性程度高的組織中陽(yáng)性表達(dá)率增高，提示VEGF在非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移中可能起重要的作用。 5 NF-кB P65與尿激酶纖溶酶原激活劑(u

14、PA)在非小細(xì)胞肺癌中均呈高表達(dá)，二者之間存在正相關(guān)關(guān)系，從而推測(cè)在非小細(xì)胞肺癌中可能通過(guò)NF-кB P65的激活來(lái)調(diào)節(jié)uPA，從而有助于腫瘤的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。 6 NF-кB P65與基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)在非小細(xì)胞肺癌中均呈高表達(dá)，二者之間存在正相關(guān)關(guān)系，從而推測(cè)在非小細(xì)胞肺癌中可能通過(guò)NF-кB P65的激活來(lái)調(diào)節(jié)MMP9，從而有助于腫瘤的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。 7 NF-кB P65與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEG