內(nèi)異癥患者內(nèi)膜中NF-кBp65的表達(dá)及其與OPN相關(guān)性研究.pdf

1、目的：
　　1.探討NF-кBp65、OPN在正常內(nèi)膜、內(nèi)異癥患者在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞中的表達(dá)情況及兩者的相關(guān)性；
　　2.分析OPN基因沉默及質(zhì)粒導(dǎo)入后NF-кBp65、OPN在內(nèi)異癥患者在位內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞中表達(dá)的變化，進(jìn)一步揭示二者在內(nèi)異癥中的關(guān)系；
　　3.探討OPN基因沉默及質(zhì)粒導(dǎo)入前后子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞侵襲性的變化。
　　方法：
　　1.收集2013年1月至2013年12月于我院因EMs行

2、腹腔鏡手術(shù)并于術(shù)中或術(shù)后經(jīng)病理科確診為子宮內(nèi)膜異位癥患者35例作為病例組，其中分泌期18例，增生期17例。收集同年因行輸卵管絕育患者在位內(nèi)膜30例作為對照組，其中分泌期15例，增生15例，采用免疫組化的方法分別檢測NF-кBp65、OPN蛋白的表達(dá)。
　　2.將內(nèi)異患者在位內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞進(jìn)行原代分離、培養(yǎng)，通過OPN siRNA及質(zhì)粒干擾子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞后經(jīng)RT-PCR及western-blot檢測NF-кBp65、OPN mR

3、NA及蛋白表達(dá)的變化。
　　3.通過侵襲小室（Transwell）檢測OPN siRNA及質(zhì)粒干擾前后子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞侵襲性的變化。
　　結(jié)果：
　　1.免疫組化檢測結(jié)果顯示：⑴NF-кBp65、OPN蛋白主要表達(dá)于子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞的胞漿中，少數(shù)于間質(zhì)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)，于內(nèi)異癥在位、異位內(nèi)膜中的表達(dá)明顯強(qiáng)于正常內(nèi)膜，且內(nèi)異癥在位內(nèi)膜中的表達(dá)強(qiáng)于正常內(nèi)膜,其差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均<0.05）；（2)NF-

4、кBp65蛋白在三組內(nèi)膜的增生期與分泌期中的表達(dá)無明顯差異,不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均〉0.05)，而OPN蛋白在三組內(nèi)膜分泌期的表達(dá)明顯高于增生期，且其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均<0.05），且二者在內(nèi)異癥在位、異位內(nèi)膜中的表達(dá)呈正相關(guān)(Pearson相關(guān)系數(shù)r在位=0.88和r異位=0.78，P均＜0.01)。
　　2.OPNsiRNA干擾后腺上皮細(xì)胞中NF-кBp65、OPNmRNA及蛋白的表達(dá)較干預(yù)前明顯下降，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

5、義（P均<0.05），OPN質(zhì)粒導(dǎo)入后NF-кBp65、OPN mRNA及蛋白表達(dá)均明顯增高，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均<0.05）。
　　3.OPNsiRNA干擾內(nèi)異癥患者在位內(nèi)膜原代腺上皮細(xì)胞后其侵襲性較干預(yù)前明顯降低，OPN質(zhì)粒干預(yù)后其細(xì)胞侵襲性明顯增加，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.NF-кBp65、OPN在內(nèi)異癥患者在位、異位內(nèi)膜均呈高表達(dá)，且二者呈明顯正相關(guān)；
　　2.O