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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:本實(shí)驗(yàn)試圖通過(guò)觀察佐劑型關(guān)節(jié)炎(adjuvant-induced arthritis,AA)大鼠的繼發(fā)側(cè)足趾腫脹度、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)及踝關(guān)節(jié)病理形態(tài)學(xué)等的改變,來(lái)明確香椿子總多酚(Total Polyphenols from seeds of Toona sinensis,TSTP)對(duì) AA大鼠是否有治療作用;通過(guò)觀察香椿子總多酚對(duì)炎性細(xì)胞因子和血管生長(zhǎng)調(diào)節(jié)因子的影響,來(lái)探討香椿子總多酚對(duì) AA大鼠發(fā)揮治療作用的可能機(jī)制。
2、> 方法:6周齡 Wistar大鼠50只,雌性,SPF級(jí),體重160±20g,隨機(jī)分為5組,每組10只:正常組、模型組、雷公藤甲素組、香椿子總多酚35mg組和香椿子總多酚70mg組。正常組在左后肢足墊部皮下注射0.1ml生理鹽水,其余組在左后肢足墊部皮下注射0.1ml弗氏完全佐劑(complete Freund's adjuvant,CFA)誘導(dǎo)建立大鼠佐劑型關(guān)節(jié)炎模型。大鼠致炎后第8天開(kāi)始灌胃治療,正常組和模型組均給予0.5%羧甲基
3、纖維素鈉(10ml/kg)、雷公藤甲素組給予雷公藤甲素(20mg/kg)、香椿子總多酚35mg組給予香椿子總多酚(35mg/kg)、香椿子總多酚70mg組給予香椿子總多酚(70mg/kg),一天一次,連續(xù)灌胃21天。大鼠于致炎前(d0)、致炎后第4、8、12、16、20、24、28天(d4、d8、d12、d16、d20、d24、d28)分別在足容積測(cè)量?jī)x上測(cè)定右側(cè)(非致炎側(cè))足容積,d4、d8、d12、d16、d20、d24、d28與
4、d0足容積的差值即為該時(shí)大鼠足趾腫脹度。最后一次灌胃結(jié)束2小時(shí)后,處理大鼠,腹主動(dòng)脈取血,采用ELISA法檢測(cè)血清中白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-10、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和內(nèi)皮抑素(endostatin,ES)的表達(dá)水平,同時(shí)摘取胸腺和脾臟組織并稱重,
5、計(jì)算胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)。并于踝關(guān)節(jié)上方0.5cm剪取踝關(guān)節(jié),采用蘇木精-伊紅染色(hematoxylin-eosin staining,HE)法制作成病理組織切片,用以觀察形態(tài)學(xué)的相關(guān)改變。
結(jié)果:與正常組相比較,模型組大鼠的繼發(fā)側(cè)足趾腫脹度、胸腺指數(shù)及脾臟指數(shù)顯著升高;踝關(guān)節(jié)可見(jiàn)明顯的病理學(xué)改變:滑膜組織充血水腫,滑膜細(xì)胞增生,排列紊亂,關(guān)節(jié)腔內(nèi)及周圍組織有大量的炎性細(xì)胞浸潤(rùn),關(guān)節(jié)軟骨受損、破壞,伴有血管翳形成;血清中炎性細(xì)
6、胞因子 IL-1β、IL-6、TNF-α和促血管生成因子 VEGF的表達(dá)水平明顯升高,而抗炎細(xì)胞因子 IL-10和抑血管生成因子 ES的表達(dá)水平明顯降低。與模型組相比較,35mg和70mg香椿子總多酚均明顯降低 CFA誘導(dǎo)的大鼠繼發(fā)側(cè)足趾腫脹度、胸腺指數(shù)及脾臟指數(shù);改善踝關(guān)節(jié)的病理組織形態(tài):滑膜增生程度減輕,關(guān)節(jié)腔及周圍組織炎性浸潤(rùn)減少,關(guān)節(jié)軟骨破壞程度減輕;下調(diào)血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、VEGF的表達(dá)水平,上調(diào) IL-1
7、0和ES的表達(dá)水平。
結(jié)論:(1)香椿子總多酚能夠降低AA大鼠的繼發(fā)側(cè)足趾腫脹度、胸腺指數(shù)及脾臟指數(shù),改善踝關(guān)節(jié)病理組織形態(tài),表明香椿子總多酚具有治療大鼠AA的作用。
(2)香椿子總多酚能夠降低AA大鼠血清中炎性細(xì)胞因子IL-1β、IL-6及TNF-α的表達(dá)水平,升高抗炎細(xì)胞因子IL-10的表達(dá)水平,改善炎性細(xì)胞因子和抗炎細(xì)胞因子的失衡,表明香椿子總多酚可能通過(guò)抗炎治療大鼠AA。
(3)香椿子總多酚能夠降低
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