阿司匹林對(duì)去卵巢大鼠骨代謝及骨髓細(xì)胞OPG-RANKL表達(dá)的影響.pdf

1、[目的]
　　 1.觀察雙側(cè)卵巢切除大鼠絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥模型的特點(diǎn)及骨代謝、OPG/RANKL/RANK系統(tǒng)的變化。
　　 2.探討阿司匹林(Aspirin)在雙側(cè)卵巢去勢(shì)的雌性大鼠絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松模型的預(yù)防效果。
　　 3.探索阿司匹林對(duì)雌性雙側(cè)卵巢去勢(shì)大鼠骨質(zhì)疏松模型體內(nèi)OPG/RANKL/RANK系統(tǒng)的影響。
　　 [方法]
　　 3月齡雌性SD大鼠，一共24只，按照體重使用隨機(jī)數(shù)表，隨機(jī)平均

2、分3組:正常對(duì)照組（Sham）、阿司匹林組(Aspirin)、和模型對(duì)照組(OVX)，每組各8只。后兩組采用雙側(cè)卵巢切除術(shù)復(fù)制骨質(zhì)疏松大鼠模型。術(shù)后2周，Aspirin組予阿司匹林34.4mg/kg/d行灌胃給藥，Sham組和OVX組予體重相應(yīng)的生理鹽水灌胃。用藥干預(yù)12周后處死，生化分析儀檢測(cè)血清離子Ca、P和堿性磷酸酶(ALP)，ELISA測(cè)血清骨代謝標(biāo)志物骨鈣素(BGP)、Ⅰ型原膠原C-端前肽(PICP)和Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(

3、CITP)，左側(cè)股骨和第4腰椎測(cè)骨密度和骨力學(xué)，qRT-PCR測(cè)全骨髓細(xì)胞的骨保護(hù)素(OPG)和核因子κB受體活化因子配體(RANKL)的mRNA表達(dá)，第3腰椎和右脛骨HE染色組織形態(tài)學(xué)觀察，右脛骨免疫組化染色分析OPG和RANKL的蛋白表達(dá)，并作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 [結(jié)果]
　　 1.血清Ca、P水平各組之間比較，差異并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 2.骨轉(zhuǎn)換指標(biāo):卵巢切除后OVX組的血清PICP較Sh

4、am組有所升高(P＜0.05)，血清ALP、BGP和ICTP均增加明顯(P＜0.01)，Aspirin組經(jīng)治療后的血清PICP較OVX組有所下降(P＜0.05)，血清ALP、BGP和ICTP均下降明顯(P＜0.01)。
　　 3.骨密度:OVX組的左側(cè)股骨和第4腰椎均較Sham組降低明顯，Aspirin組能夠較OVX組提高腰椎骨密度（P＜0.05）但對(duì)股骨骨密度影響不大(P＞0.05)。
　　 4.骨生物力學(xué):OVX組相

5、對(duì)Sham組的骨折風(fēng)險(xiǎn)度增高，Aspirin組較OVX組能夠提升股骨骨折臨界載荷(P＜0.05)和顯著提升剛度系數(shù)(P＜0.01)，但對(duì)腰椎骨折風(fēng)險(xiǎn)預(yù)防的作用差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 5.實(shí)時(shí)熒光定量qRT-PCR檢測(cè)全骨髓細(xì)胞:OVX組較Sham組主要表現(xiàn)為OPG的表達(dá)下降不明顯（P＞0.05）但RANKL的表達(dá)量增多（P＜0.05），從而OPG/RANKL的比率顯著下降，Aspirin組相對(duì)OVX組對(duì)OPG表

6、達(dá)的提高作用不明顯(P＞0.05)，但能夠降低RANKL的表達(dá)(P＜0.05)，總體而言顯著升高了OPG/RANKL的比率。
　　 6.免疫組化染色分析右脛骨干骺端OPG和RANKL的蛋白表達(dá):OVX組相對(duì)于Sham組的RANKL的蛋白含量顯著增高(P＜0.01)導(dǎo)致OPG/RANKL的比率明顯下降(P＜0.01)，Aspirin組較OVX組主要是顯著降低了RANKL蛋白的含量(P＜0.01)從而增大OPG/RANKL的比率(P

7、＜0.05)。
　　 7.HE染色觀察第3腰椎和右脛骨上端病理組織脫鈣切片:OVX組骨小梁排列和結(jié)構(gòu)呈典型的骨質(zhì)疏松改變，而Aspirin組能夠部分修復(fù)骨小梁的斷裂和增加小梁數(shù)目。
　　 [結(jié)論]
　　 1.雙側(cè)卵巢切除大鼠表現(xiàn)出絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的特點(diǎn)，伴有骨轉(zhuǎn)換增強(qiáng)和OPG/RANKL/RANK系統(tǒng)的失衡。
　　 2.Aspirin可以部分減緩去卵巢大鼠絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松模型的骨量丟失。
　　 3.