鮭魚降鈣素對去卵巢大鼠骨代謝及骨組織RUMX2-PPARγ和OPG-RANKL表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：⑴探討去卵巢大鼠骨密度、骨代謝及骨組織成骨分化、成脂分化和破骨分化相關(guān)基因蛋白表達(dá)的變化；⑵探討鮭魚降鈣素(sCT)對去卵巢大鼠骨密度及骨代謝影響；⑶探討鮭魚降鈣素對去卵巢大鼠骨組織成骨分化、成脂分化和破骨分化相關(guān)基因蛋白的影響。
　　 方法：將3月齡雌性SD大鼠24只隨機(jī)分為3組:假手術(shù)組(SHAM)、去卵巢組(OVX)和降鈣素組(sCT)，每組8只。采用雙側(cè)卵巢切除術(shù)復(fù)制骨質(zhì)疏松大鼠模型。sCT組大鼠采用皮下注射sCT

2、2U/kg·d，Sham組及OVX組大鼠頸部皮下注射0.9％生理鹽水5 ml/kg·d。給藥12周，應(yīng)用雙能X線吸收儀法(DXA)測第四腰椎和股骨骨密度(BMD)。ELISA法測量大鼠血清中BGP、PICP及ICTP濃度。HE染色觀察第三腰椎和脛骨近端骨小梁及脂肪細(xì)胞計(jì)數(shù)。脛骨近端骨組織OPG/RANKL蛋白表達(dá)量測量采用免疫組織化學(xué)染色法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR(QRT-PCR)法測量骨髓細(xì)胞RUNX2、PPARγ、OPG及RANKL m

3、RNA表達(dá)量。
　　 結(jié)果：①與SHAM組比較，去卵巢大鼠腰椎和股骨骨量減少，血清骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物BGP、PICP和ICTP升高。與SHAM組比較，去卵巢后大鼠骨髓細(xì)胞RUNX2和PPARγ mRNA表達(dá)增強(qiáng)，骨髓腔中脂肪細(xì)胞數(shù)量增多。去卵巢大鼠脛骨干骺端RANKL蛋白和骨髓細(xì)胞RANKL mRNA表達(dá)增強(qiáng)，但是OPG蛋白和mRNA表達(dá)無明顯減少。②與OVX組比較，sCT組大鼠腰椎骨量增加，股骨骨量無明顯增加。sCT組血清BGP、P

4、ICP和ICTP水平降低。sCT組大鼠骨髓細(xì)胞RUNX2 mRNA表達(dá)下降，但骨髓腔脂肪細(xì)胞及PPARγ mRNA表達(dá)無明顯下降。降鈣素可以增加脛骨干骺端OPG蛋白和股骨骨髓細(xì)胞OPG mRNA表達(dá)，但是對RANKL蛋白和mRNA表達(dá)無明顯減少。
　　 結(jié)論：⑴去卵巢后大鼠骨組織RANKL及PPARγ表達(dá)增強(qiáng)，分別促進(jìn)破骨細(xì)胞和脂肪分化。并且RUNX2反應(yīng)性增強(qiáng)，促進(jìn)成骨細(xì)胞分化。因此，大鼠去卵巢后最終表現(xiàn)出骨量丟失和高轉(zhuǎn)換骨代