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文檔簡介
1、目的:應(yīng)用RT-PCR檢測miRNA-200c和Bmi-1基因在膀胱尿路上皮癌中的表達,并結(jié)合Western-blot檢測膀胱尿路上皮癌中Bmi-1蛋白的表達情況,探討兩者在膀胱癌中的臨床意義,初步揭示Bmi-1和miRNA-200c在膀胱尿路上皮癌中的作用及兩者之間的相互關(guān)系。
方法:選取2011年8月至2012年6月期間于我院行手術(shù)切除治療的膀胱尿路上皮癌新鮮腫瘤標本20例,新鮮癌旁標本10例作為對照。應(yīng)用實時定量PC
2、R方法檢測腫瘤和癌旁標本中Bmi-1和miRNA-200c的表達情況,同時應(yīng)用Western-blot檢測腫瘤和癌旁標本的Bmi-1蛋白表達情況。實驗組標本中,按照2004年WHO病理分級,低分級尿路上皮癌組12例,高分級(包括浸潤性)尿路上皮癌組8例。按照TNM臨床分期標準:Tis~T1期9例,T2~T4期11例。
結(jié)果:⑴RT-PCR檢測10例膀胱癌組織和10例對應(yīng)的癌旁組織的Bmi-1表達,結(jié)果顯示膀胱癌組織中Bmi
3、-1相對表達量0.843±0.232;癌旁組織Bmi-1相對表達量為0.167±0.031,兩者相比統(tǒng)計學(xué)上有非常顯著的差異(P<0.01)。⑵分析其中10例膀胱癌組織和10例對應(yīng)的癌旁組織的miRNA-200c的PCR結(jié)果,結(jié)果顯示膀胱癌組織miRNA-200c相對表達量為0.219±0.039;癌旁組織miRNA-200c相對表達量為0.026±0.008;兩者相比統(tǒng)計學(xué)上有非常顯著的差異(P<0.01)。⑶Western-blot
4、檢測其中6例膀胱癌組織和6例對應(yīng)的癌旁組織的Bmi-1蛋白表達,結(jié)果顯示在膀胱癌組織Bmi-1蛋白相對表達量為0.861±0.129;癌旁組織Bmi-1蛋白相對表達量為0.169±0.049;兩者相比統(tǒng)計學(xué)上有非常顯著的差異(P<0.01)。⑷RT-PCR檢測20例膀胱癌組織的miRNA-200c表達,按其表達量從高至低排序,把前10組定為miRNA-200c高表達組,后10組定為低表達組。高表達組Bmi-1相對表達量為0.201±0.
5、043;低表達組Bmi-1相對表達量為:0.835±0.193;兩者相比統(tǒng)計學(xué)上有顯著的差異(P<0.01)。⑸miRNA-200c高表達組Bmi-1蛋白相對表達量為0.605±0.089;低表達組Bmi-1蛋白相對表達量為1.118±0.177;兩者相比統(tǒng)計學(xué)上有顯著的差異(P<0.01)。⑹RT-PCR檢測20例膀胱癌組織的miRNA-200c表達,病理分級高級別組miRNA-200c相對表達量0.103±0.033,低級別組miR
6、NA-200c相對表達量0.269±0.076,兩者間差異有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。不同臨床分期中,Tis~T1組miRNA-200c相對表達量0.189±0.021,T2~T4組相對表達量:0.034±0.017,兩組相比統(tǒng)計學(xué)上有顯著的差異(P<0.01)。⑺通過RT-PCR檢測20例膀胱癌組織的Bmi-1表達,病理分級高級別組Bmi-1相對表達量0.617±0.128,低級別組Bmi-1相對表達量0.231±0.088,
7、兩者間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。不同臨床分期中,Tis~T1組Bmi-1相對表達量:0.257±0.094,T2~T4組相對表達量:0.589±0.148,兩組相比統(tǒng)計學(xué)上有顯著的差異(P<0.01)。⑻通過Western-blot檢測20例膀胱癌組織的Bmi-1蛋白表達,高級別組Bmi-1蛋白相對表達量1.032±0.328,低級別組Bmi-1蛋白相對表達量0.327±0.108,兩者間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。不同臨
8、床分期中,Tis~T1組Bmi-1蛋白相對表達量0.213±0.079,T2~T4組相對表達量0.911±0.232,兩組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。說明患者病理分級和分期越高,Bmi-1蛋白表達量越高,病理分級和分期越低,Bmi-1蛋白表達量越低。與前面RT-PCR結(jié)果一致。
結(jié)論:①膀胱尿路上皮癌及癌旁組織中均表達Bmi-1,且在腫瘤組織中其表達量明顯高于癌旁組織(P<0.01);膀胱尿路上皮癌及癌旁組織中均
9、表達miRNA-200c,且在腫瘤組織中其表達量明顯高于癌旁組織(P<0.01)。說明Bmi-1和miRNA-200c均與膀胱尿路上皮癌的發(fā)生發(fā)展過程密切相關(guān)。②臨床病理分級和分期越高,miRNA-200c的表達量越低;而隨著臨床病理分級分期越高,Bmi-1及其蛋白的表達量越高,提示miRNA-200c和Bmi-1的表達和臨床病理分級分期密切相關(guān)(P<0.01)。③Bmi-1相對表達量在miRNA-200c高表達組中其表達量明顯低于mi
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