正常家兔頸椎椎間盤內神經分布的實驗性研究.pdf

1、目的：頸性眩暈的發(fā)病機制比較復雜，在眾多的病因中交感神經因素起到了非常重要的作用。然而關于交感神經導致頸性眩暈的具體機制目前還不太清楚。近年來，經皮激光椎間盤減壓術治療頸性眩暈取得了顯著的療效。這意味著頸椎椎間盤和椎動脈之間可能存在著某些必然的聯系，而這種聯系的中介很可能就是位于椎動脈和椎間盤及其周圍組織內的神經纖維，因此頸椎椎間盤內的神經分布情況就成了我們最關注的問題。到目前為止，關于椎間盤神經分布的研究很多，但是這些研究主要集中在腰

2、椎間盤，關于頸椎椎間盤神經分布的研究卻很少。研究證實腰椎間盤尤其是退變或突出的腰椎間盤的纖維環(huán)外1/3存在著交感神經纖維和感覺神經纖維，腰椎間盤內的感覺神經纖維是由上腰部的背根神經節(jié)發(fā)出，通過交感神經干、經灰交通支分布到腰椎間盤纖維環(huán)的。這些關于腰椎間盤神經分布的研究為關于頸椎椎間盤神經分布的研究提供了可以借鑒的經驗。本研究的目的是應用辣根過氧化物酶(HRP)示蹤方法和免疫組織化學染色方法，對正常家兔頸椎椎間盤進行研究，觀察正常家兔頸椎

3、椎間盤周圍是否存在神經纖維，如果存在神經纖維則進一步確定神經的種類，并確定頸椎椎間盤內感覺神經纖維的來源。作為對比，同時進行腰椎間盤神經的免疫組織化學染色。 方法：本實驗選取15只日本大耳白兔為實驗對象，隨機將實驗動物分為兩組進行實驗，分別為椎間盤(IVD)組5只和背根神經節(jié)(DRG)組10只。 1、在椎間盤(IVD)組，選取C<,5/6>頸椎椎間盤標本，制成厚度為5μm的石蠟切片。并進行蘇木精．伊紅染色，觀察頸椎椎間盤

4、的正常組織學形態(tài)；選取C<,6/7>頸椎椎間盤標本，石蠟切片，切片厚度為5μm，每個椎間盤切取三張切片，分別進行一般神經標記物神經絲蛋白(NF)、傳遞傷害性刺激的感覺神經標志物P物質(SP)和交感神經的標志物神經肽Y的C端連接肽(CPON)的免疫組織化學染色。觀察正常家兔頸椎椎間盤內神經生長情況。作為對照，同時選取L<,4/5>、L<,5/6>腰椎間盤標本分別進行蘇木精．伊紅染色和椎間盤免疫組織化學染色。 2、背根神經節(jié)組分為交

5、感神經完整組(nontreated group)和交感神經切斷組(sympathectomized group)，每組5只，進行辣根過氧化物酶示蹤實驗。在交感神經完整組內，保留家兔交感神經的完整性；在交感神經切斷組內，于頸部交感干靠近頸下神經節(jié)的下方切斷交感干。兩組分別進行椎間盤后方神經纖維的辣根過氧化物酶神經示蹤實驗。應用微量注射器在兩組實驗對象的C<,4/5>、C<,5/6>、C<,6/7>椎間盤后緣注射辣根過氧化物酶。動物存活48

6、小時后將動物處死，取雙側頸部(C<,4～8>)和上胸部(T<,1-5>)脊髓節(jié)段的背根神經節(jié)，觀察神經節(jié)內神經元的標記情況。 結果：腰椎間盤纖維環(huán)周圍組織存在著豐富的神經纖維。在腰椎間盤切片中，纖維環(huán)后方存在NF免疫反應陽性神經纖維的切片數為4個，陽性率為80％；CPON免疫反應陽性神經纖維的切片數為3個，陽性率為60％；SP免疫反應陽性纖維的切片數為2個，陽性率為40％。同時在腰椎間盤的前方我們也發(fā)現了各類免疫反應陽性神經纖維

7、的存在。在頸椎纖維環(huán)切片內，頸椎椎間盤纖維環(huán)的后方存在NF免疫陽性纖維的切片數為4個，陽性率為80％；頸椎椎間盤纖維環(huán)的后方組織內存在COPN免疫陽性纖維的切片數為1個，陽性率為20％；沒有發(fā)現SP免疫陽性神經纖維的存在。 在辣根過氧化物酶示蹤實驗中，在交感神經完整組和交感神經切斷組的背根神經節(jié)中，均未發(fā)現被HRP標記的神經元胞體。 結論：頸椎椎間盤周圍存在著神經纖維，其中包括CPON免疫反應陽性的交感神經纖維。頸椎椎間