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文檔簡介
1、目的:觀察結(jié)直腸癌患者腫瘤組織和癌旁組織之間腸道微生態(tài)構(gòu)成及多樣性。
方法:選取14名接受手術(shù)治療的結(jié)直腸腫瘤患者,取腫瘤組織(粘膜面14份,漿膜面14份)、14份相對應(yīng)粘膜癌旁組織(距腫瘤4~7cm),應(yīng)用QIAamp DNA Mini Kit從腫瘤組織(漿膜、粘膜)及癌旁組織內(nèi)提取細(xì)菌DNA,PCR法擴(kuò)增細(xì)菌16 s DNA V3~V5區(qū)序列,行瓊脂凝膠電泳檢測目的基因。然后采用454測序方法,對結(jié)直腸腫瘤組織及癌旁組
2、織進(jìn)行測序,觀察兩者腸道細(xì)菌的組成。
結(jié)果:
1.腸道粘膜面腫瘤組織與癌旁組織可見細(xì)菌基因擴(kuò)增,而漿膜面腫瘤組織未見細(xì)菌基因擴(kuò)增。
2.454測序結(jié)果:Shanonn指數(shù)在兩組樣品中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05),腫瘤組織與癌旁組織OTU數(shù)目分別為4156±471和4612±931,Chao(1)指數(shù)分別為846±231和906±286,兩者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05);在門水平,兩組
3、樣本菌落組成是相似的;在屬水平,大部分菌屬是沒有差異性的,腫瘤組織中,蒼白桿菌屬、梭菌屬、芽孢桿菌屬內(nèi)所占比例分別為0.0465±0.011,0.0712±0.012,0.308±0.076,高于癌旁組織中所占比例0.0367±0.006,0.0605±0.009,0.230±0.065,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.806,p=0.015; t=2.775,p=0.016; t=2.536,p=0.024);腫瘤組織中考拉桿菌屬、甲基桿菌
4、屬及脫硫桿菌屬所占比例為分別為0.078±0.007,0.0168±0.009,0.0985±0.041,低于癌旁組織中所占比例0.917±0.022,0.0262±0.007,0.134±0.039,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.178,p=0.048; t=3.517,p=0.004; t=2.314,p=0.038)。
結(jié)論:
1.對于結(jié)直腸腫瘤T分期為T4a或T4b的患者,漿膜面腫瘤組織未見細(xì)菌存在。
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