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文檔簡(jiǎn)介
1、第一部分,研究目的:探討姜黃素對(duì)新生大鼠卵巢卵泡發(fā)育和卵母細(xì)胞凋亡的影響。
材料與方法:雌性SD 大鼠分為母鼠灌胃組(受孕11.5 d 母鼠灌胃姜黃素(100 mg ﹒kg -1 ﹒d -1 )直至分娩,分別取出生后1、2和4 d 齡雌仔鼠卵巢),新生鼠腹腔注射組(正常出生1 d的雌仔鼠腹腔注射姜黃素(100 mg ﹒kg -1 ﹒d -1 ),連續(xù)4 d,分別取出生后2、4 d 齡卵巢)和對(duì)照組(以母、幼均未用藥的正常同
2、天齡新生鼠的卵巢為對(duì)照)。所取卵巢經(jīng)固定、脫水、包埋后切片,應(yīng)用蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosin, HE)染色,觀察不同發(fā)育階段的卵泡比例,末端脫氧核苷?;D(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTp缺口末端標(biāo)記法(TdT-mediated dUTpNick-EndLabeling, TUNEL)染色檢測(cè)卵巢內(nèi)卵母細(xì)胞凋亡情況。
結(jié)果:在1 d 齡卵巢中,母鼠灌胃組未裝配卵泡的比例明顯低于對(duì)照組(p<0.05)而原始卵泡的比例明顯
3、增加(p<0.05);在2 d 齡卵巢中,新生鼠腹腔注射組未裝配卵泡比例明顯低于對(duì)照組(p<0.01),而原始卵泡比例則明顯高于對(duì)照組(p<0.05);在4 d 齡卵巢中,腹腔注射組的原始卵泡比例顯著下降(p<0.05),早期初級(jí)、發(fā)育卵泡比例顯著升高(p<0.01 ;p<0.05)。在1、2 d 齡卵巢中,母鼠灌胃組和新生鼠腹腔注射組卵母細(xì)胞TUNEL陽(yáng)性率均明顯低于對(duì)照組(p<0.05 ;p<0.01)。
結(jié)論:姜黃素
4、能加快新生大鼠卵母細(xì)胞巢破裂,促進(jìn)原始卵泡的發(fā)育啟動(dòng),同時(shí)能抑制卵母細(xì)胞凋亡。
第二部分,研究目的:探討四種植物多酚類物質(zhì)是否能增加老年大鼠卵巢的卵泡儲(chǔ)備,延長(zhǎng)其生殖壽命。
材料與方法:54只11月齡的SD 大鼠分為五組,分別為對(duì)照組、茶多酚灌胃組(100 mg ﹒kg -1 ﹒d -1 )、槲皮素灌胃組(50 mg ﹒kg -1 ﹒d -1 )、染料木素灌胃組(160 mg ﹒kg -1 ﹒d -1 )和白
5、藜蘆醇灌胃組(25 mg ﹒kg -1 ﹒d -1 ),用藥組大鼠每天灌胃一次。每天檢查陰道涂片觀察動(dòng)情周期,每周對(duì)大鼠稱重觀察藥物對(duì)老年大鼠體重的影響,連續(xù)進(jìn)行四個(gè)月。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),所有大鼠麻醉后處死,取卵巢組織進(jìn)行切片,HE染色觀察并分別計(jì)數(shù)5 張有代表性的組織切片中存活和閉鎖的卵泡數(shù)以及存活卵泡中各級(jí)卵泡數(shù)占存活總卵泡數(shù)的比例。所有數(shù)據(jù)以x_± SEM 表示,組間比較用方差分析和卡方檢驗(yàn)。
結(jié)果:與對(duì)照組相比,茶多酚組
6、存活卵泡總數(shù)為27.8 ± 3.2,與對(duì)照組(26.9 ± 3.8)相近,但閉鎖卵泡總數(shù)明顯減少(43.4 ± 5.9 vs 79.7 ± 7.5)(p<0.001)。槲皮素組的存活卵泡總數(shù)(36.5 ± 4.1)和閉鎖卵泡總數(shù)(68.8 ± 6.7)均與對(duì)照組相近。另外,與對(duì)照組相比,染料木素組和白藜蘆醇組的存活卵泡總數(shù)均明顯增多(42.8 ± 3.9, 51.9 ± 6.4)(p<0.05, p<0.001),而閉鎖卵泡均明顯減少(
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