脫氫表雄酮硫酸酯對地佐環(huán)平所致記憶損傷小鼠的作用及機(jī)制.pdf

1、神經(jīng)甾體是一種不依賴于外周而在腦內(nèi)獨(dú)立合成的甾體激素，對多種神經(jīng)遞質(zhì)受體均有調(diào)節(jié)作用，對神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)揮廣泛作用，并且參與學(xué)習(xí)記憶過程。脫氫表雄酮和脫氫表雄酮硫酸酯是神經(jīng)甾體中二個不同的代謝產(chǎn)物，研究表明兩者對記憶都有提高作用。一氧化氮通路參與許多生理過程，如學(xué)習(xí)記憶，攝食行為和神經(jīng)發(fā)育等。另外谷氨酸能神經(jīng)系統(tǒng)與記憶密切相關(guān)，兩者之間聯(lián)系也相當(dāng)密切。 我們的實(shí)驗(yàn)首先觀察了脫氫表雄酮硫酸酯對于地佐環(huán)平所致記憶損傷小鼠的作用；繼而又觀察

2、了其對地佐環(huán)平所致記憶損傷小鼠皮層和海馬NO及NOS活性的影響，以明確二者是否通過提高NO及NOS活性來影響記憶；在此基礎(chǔ)上，我們進(jìn)一步觀察了二者對于NMDA受體功能的作用，以明確其是否通過谷氨酸能神經(jīng)系統(tǒng)影響記憶。 第一部分 目的：觀察脫氫表雄酮硫酸酯對地佐環(huán)平所致記憶損傷小鼠的作用。 方法：將小鼠隨機(jī)分為正常對照組，模型組，DMSO(5％)預(yù)處理組，脫氫表雄酮硫酸酯(5mg/kg，10mg/kg，20mg/k

3、g)預(yù)處理組。在訓(xùn)練前30min，藥物預(yù)處理組分別皮下注射上述劑量的脫氫表雄酮硫酸酯，溶劑預(yù)處理組皮下注射DMSO(5％)，訓(xùn)練前10min，正常對照組腹腔注射NS，其余各組均腹腔注射地佐環(huán)平(0.15mg/kg)。利用跳臺實(shí)驗(yàn)和避暗實(shí)驗(yàn)，記錄訓(xùn)練后24h的跳臺錯誤次數(shù)、跳臺潛伏期和避暗潛伏期。 結(jié)果：地佐環(huán)平能明顯增加跳臺的錯誤次數(shù)(P<0.01)，縮短跳臺潛伏期(P<0.01)和避暗潛伏期(P<0.01)。以脫氫表雄酮硫酸酯

4、(10mg/kg，20mg/kg)預(yù)處理均能明顯降低跳臺的錯誤次數(shù)(P<0.01，P<0.01)，并顯著延長跳臺潛伏期(P<0.01，P<0.05)和避暗潛伏期(P<0.05，P<0.05)。二個劑量之間無劑量效應(yīng)關(guān)系。 結(jié)論：脫氫表雄酮硫酸酯均對地佐環(huán)平所致的小鼠記憶損傷有改善作用。 第二部分 目的：觀察脫氫表雄酮硫酸酯對于地佐環(huán)平所致記憶損傷小鼠的皮層和海馬NO及NOS活性的影響，以明確二者是否通過提高NO及

5、NOS活性來影響記憶。 方法：將小鼠隨機(jī)分為正常對照組，脫氫表雄酮硫酸酯對照組(20mg/kg)，模型組，DMSO(5％)預(yù)處理組，脫氫表雄酮硫酸酯(5 mg/kg，10 mg/kg，20 mg/kg)預(yù)處理組。除脫氫表雄酮硫酸酯對照組，在訓(xùn)練前30min，皮下注射上述劑量的脫氫表雄酮硫酸酯，其余各組給藥方案與第一部分相同。24h后分別測定各組小鼠皮層和海馬的NO及NOS活性。 結(jié)果：地佐環(huán)平引起皮層和海馬的NOS活性明

6、顯下降(P<0.01)，NO含量明顯上升(P<0.01)，以脫氫表雄酮硫酸酯預(yù)處理(10mg/kg，20mg/kg)均能明顯增強(qiáng)皮層和海馬的NOS活性(P<0.05，P<0.01)，同時提高皮層和海馬的NO含量(P<0.05，P<0.05)。 結(jié)論：脫氫表雄酮硫酸酯均能增強(qiáng)皮層和海馬的NOS活性，提高NO含量，這是二者改善記憶的機(jī)制之一。 第三部分 目的：觀察脫氫表雄酮硫酸酯對NMDA受體功能的作用，以明確二者是

7、否通過谷氨酸能神經(jīng)系統(tǒng)影響記憶。 方法：將PC12細(xì)胞隨機(jī)分成對照組，模型組，脫氫表雄酮硫酸酯(10μmol·L<'-1>，100μmol·L<'-1>)預(yù)處理組。模型組以NMDA(10μmol·L<'-1>)刺激20s后測定細(xì)胞內(nèi)游離Ca<'2+>濃度；各給藥組經(jīng)24h的預(yù)處理以后，再以NMDA(10μmol·L<'-1>)刺激20s，然后測定細(xì)胞內(nèi)游離Ca<'2+>濃度。 結(jié)果：與對照組相比，模型組細(xì)胞內(nèi)游離Ca<'