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文檔簡介
1、鑒于脫氫表雄酮對VSMCs增殖及其調控因子的研究較少,該研究旨在細胞水平觀察脫氫表雄酮對VSMCs增殖的影響,繼而探討脫氫表雄酮對VSMCs增殖活性刺激因子表達的關系,擬初步探索脫氫表雄酮對VSMCs增殖的可能作用機制,為脫氫表雄酮對男性心血管的保護作用提供部分理論依據(jù).方法:1.貼塊法培養(yǎng)血管平滑肌細胞,采用第3-6代細胞,使用不同濃度DHEA及ER和AR拮抗劑對細胞刺激24小時,MTT法檢測DHEA對VSMCs增殖的影響.2.采用第
2、3-6代血管平滑肌細胞,給予10<'-8>M DHEA刺激24小時,裂解細胞提取蛋白,考馬斯亮藍G-250染色法測定蛋白濃度,使用Western Blotting法檢測PDGFR-β蛋白表達量.3.采用第3-6代血管平滑肌細胞,給予10<'-8>M DHEA刺激24小時,提取總RNA,RT-PCR法檢測AT<,1>mRNA的相對表達量.裂解細胞,考馬斯亮藍G-250染色法測定蛋白濃度,使用Western Blotting法檢測AT<,1
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