抗血栓和促內(nèi)皮化雙重功能生物活性涂層的制備與研究.pdf

1、冠心病被認為是威脅人類生命健康的重大疾病之一，冠心病的臨床治療一般采用藥物治療、外科手術(shù)治療和介入治療。但是，目前在接受介入治療的患者中，約有95％以上的病例需要重新植入支架，而且，20～30%支架內(nèi)再狹窄率仍是支架植入術(shù)后最常見的問題。藥物洗脫性支架(Drug Eluting Stent，DES)被認為是冠狀動脈介入治療的里程碑。自從第一代紫杉醇藥物洗脫性支架和雷帕霉素支架應(yīng)用到臨床以來，支架內(nèi)再狹窄率一度降低到10%。然而，近來一些

2、報道稱，藥物洗脫性支架雖然降低了再狹窄率的發(fā)生，但是支架表面攜帶的聚合物會引起一些副作用，諸如慢性動脈壁炎癥、內(nèi)皮功能障礙和延遲愈合等問題。所有這些因素會促使藥物洗脫性支架植入后引起后期血栓的發(fā)生。盡管這些問題在臨床上沒有足夠的病例出現(xiàn)，但后期血栓被認為是藥物洗脫性支架所帶來的最嚴重的問題。所以，在新一代藥物洗脫性支架的研發(fā)與制備過程中，如何加速支架表面內(nèi)皮化和減少支架表面血栓的形成成為首要問題。
　　 肝素作為抗凝劑已經(jīng)被廣泛

3、地應(yīng)用于臨床，它在抑制支架內(nèi)亞急性血栓的形成過程中具有無可爭論的作用；細胞外基質(zhì)纖維連接蛋白(Fibronectin)中的RGD能夠促進細胞粘附、擴展和分化；血管內(nèi)皮細胞生長因子(vascular endothelialgrowth factor，VEGF)能夠介導(dǎo)細胞增殖與分化以及誘導(dǎo)心血管的形成。本研究的目的在于通過層層自組裝的原理在鈦合金表面構(gòu)建肝素、內(nèi)皮細胞生長因子和纖維連接蛋白生物活性涂層，利用肝素能有效抑制血小板聚集從而達到

4、抗血栓的作用，利用纖維連接蛋白能夠促進細胞粘附、鋪展以及血管內(nèi)皮細胞生長因子能夠促進細胞增殖的原理來促進支架材料實現(xiàn)快速內(nèi)皮化，從而達到抗血栓和促進內(nèi)皮化的雙重功效。本論文的主要內(nèi)容和結(jié)果如下：
　　 ①靜態(tài)水接觸角測試證明，隨著組裝物質(zhì)的不斷沉積，鈦合金表面的親疏水性發(fā)生變化，材料表面親疏水性的變化與材料表面最外層物質(zhì)有關(guān)；表面等離子體(SPR)結(jié)果顯示隨著組裝層數(shù)的增加，SPR角呈現(xiàn)線性增加；原子力顯微鏡(AFM)結(jié)果證實，

5、經(jīng)過組裝后的鈦合金表面形貌發(fā)生明顯變化。
　　 ②體外血液相容性實驗證實，通過自組裝方法改性后的鈦合金和沒有處理過的鈦合金溶血率都低于國家安全性規(guī)定的5%；組裝(Hep/VEGF)5和(Hep/VEGF)5-Fn的鈦合金能夠有效抑制血小板的聚集和活化；自組裝改性能夠有效延長凝酶原時間(PT)和活化部分凝血酶時間(APTT)，具有較好的血液相容性。
　　 ③細胞增殖實驗說明，在組裝的過程中，血管內(nèi)皮細胞生長因子和纖維連接蛋

6、白的活性沒有被破壞，組裝(Hep/VEGF)5和(Hep/VEGF)5-Fn的鈦合金能夠有效促進細胞的增殖；改性后鈦合金對細胞生長的促進作用是復(fù)合涂層共同作用的結(jié)果；細胞粘附實驗證實，改性后的鈦合金允許內(nèi)皮細胞的粘附，且粘附在(Hep/VEGF)5-Fn改性后的鈦合金表面的細胞形態(tài)及數(shù)量明顯優(yōu)于沒有改性的鈦合金材料。經(jīng)過(Hep/VEGF)5-Fn改性后的鈦合金不僅NO的分泌量得到明顯的增加，而且總抗氧化能力T-AOC也得到了顯著提高，