低分子量藻酸雙酯鈉的制備及其抗血栓活性研究.pdf

1、藻酸雙酯鈉(Propylene Glycol Alginate Sodium Sulfate，PSS)是我國研發(fā)的第一個海洋糖類藥物，為類肝素藥，臨床上主要用于缺血性腦血管疾病如腦血栓、腦梗塞、短暫性腦缺血發(fā)作及心血管疾病如高血壓、高脂蛋白血癥、冠心病、心絞痛等疾病的防治。PSS也可用于治療彌漫性血管內(nèi)凝血、慢性腎小球腎炎及出血熱等。此外，PSS還有降血糖和降血壓等多種擴展應用。PSS是由海帶提取物褐藻酸經(jīng)過降解、丙酯化、磺酸化修飾得到

2、的一種海洋硫酸多糖類藥物，制備工藝決定了PSS是由不同分子量、不同酯化及磺化度的聚甘露糖醛酸和聚古羅糖醛酸組成的一種多糖硫酸酯類的混合物，也決定了PSS的多組分，多靶點的特性。
　　 本論文以臨床療效確切的類肝素海洋藥物藻酸雙酯鈉(PSS)為研究對象，進行不同分子量PSS組分的制備和分離，研究不同組分的作用靶點和作用規(guī)律，明確不同PSS組分與適應證之間的關系，獲得藥效更佳的PSS組分，減少臨床不良反應，提高PSS的主治療效，為深

3、入開發(fā)PSS類藥物奠定基礎。
　　 本論文首先利用Fenton法對PSS進行降解，確立了制備重均分子量為9000、6000、4000、3000 Da左右的低分子量PSS的工藝路線，并進行了理化性質(zhì)和結構分析。通過高效凝膠色譜(HPGPC)、總糖糖醛酸含量測定、含硫量測定、異羥肟酸鐵反應檢測酯基等分析方法發(fā)現(xiàn)，與原PSS相比，低分子量PSS分子量分布更為集中，總糖糖醛酸含量、含硫量等基本理化性質(zhì)仍然符合PSS原有標準。通過IR、1

4、3C NMR，MS等結構分析手段對比低分子量PSS和原PSS的結構發(fā)現(xiàn)，低分子量PSS的主要官能團以及糖鏈、糖環(huán)結構與原PSS基本一致。因此Fenton降解可以作為一種有效的手段制備質(zhì)量標準相對穩(wěn)定、結構與PSS原料藥無明顯差異的低分子量PSS。
　　 本論文從體外和體內(nèi)兩個水平系統(tǒng)評價了低分子量PSS的抗凝血活性和抗血栓活性，并與乙醇分級方法制備的高分子量PSS的活性進行了對比。體外水平考察了低分子量PSS對ATⅢ介導的FⅡa

5、、.FⅩa的抑制率以及對大鼠血漿APTT的影響。結果表明，PSS對FⅡa因子的抑制作用較強，對FⅩa的抑制作僅在PSS達到較高的濃度才能發(fā)揮作用；對兩種因子的抑制作用均是隨著PSS分子量的升高逐漸增強；低分子量PSS可以明顯延長大鼠血漿的APTT，并且分子量越高延長效果越明顯。體內(nèi)水平考察了低分子量PSS對小鼠凝血時間、出血時間，小鼠體內(nèi)血栓形成，大鼠體外血栓形成，大鼠體內(nèi)血栓形成和大鼠血清組織性纖溶酶原激活劑(t-PA)含量的影響。結

6、果表明低分子量PSS能明顯延長小鼠凝血時間，明顯降低大鼠體外血栓形成的長度和重量，具有抗凝血活性，并且隨著分子量升高抗凝血活性增強；PSS隨著分子量升高抑制血小板和毛細血管止血功能的作用增強，因此低分子量PSS降低了原PSS對應的出血時間和皮下出血副作用，并且仍具有顯著抑制血小板聚集所致的血栓的作用，有望作為新型抗血栓劑使用：低分子量PSS能明顯延長電刺激大鼠頸總動脈血栓形成時間，對大鼠體內(nèi)血栓有良好的治療效果：PSS對纖溶系統(tǒng)的激活作