加工方法對半夏質量的影響及不同葉型半夏遺傳多樣性與其品質的初步研究.pdf

1、半夏來源于天南星科植物半夏Pinellia ternata（Thunb.）breit.的干燥塊莖，辛、溫，有小毒，具有燥濕化痰、降逆止嘔、消痞散結之功效[1]。半夏是一種適應性很強的雜草性植物，在我國大部分省區(qū)均有分布。
　　課題組對主產(chǎn)區(qū)四川、貴州、甘肅半夏生產(chǎn)情況進行了實地考察，了解不同產(chǎn)區(qū)半夏的生長環(huán)境、變異情況及藥材初加工方法。通過考察發(fā)現(xiàn)，生長在不同環(huán)境甚至同一環(huán)境下的居群間都存在變異，主要體現(xiàn)在半夏植株的葉形和珠芽上。

2、另外，半夏產(chǎn)地初加工方法多為去皮-熏硫-干燥，熏硫處理后的半夏色澤好，易干燥、易儲藏、防蟲，熏硫不當除對半夏的化學成分產(chǎn)生了影響外，還導致外源性有毒物質二氧化硫的殘留超標，影響半夏的臨床療效。針對以上情況，本課題進行了半夏產(chǎn)地初加工方法和不同葉型半夏遺傳多樣性與品質的初步研究，研究內容及結果如下：
　　1．半夏產(chǎn)地初加工研究
　?。?）本課題對半夏進行了烘干、曬干、真空冷凍干燥、減壓干燥、遠紅外干燥、熏硫處理等6種方法的研究

3、，將其加工品與購買的2批商品半夏（熏硫）從藥材的外觀性狀、折干率、總酸及總生物堿含量、浸出物、總灰分及酸不溶性灰分等方面進行評價。結果發(fā)現(xiàn)，烘干、曬干、真空冷凍干燥、減壓干燥、遠紅外干燥的半夏在外觀性狀上差異較大，以曬干最好；其浸出物、總酸含量間無顯著性差異；除真空冷凍干燥外，其余4種方法對半夏總生物堿含量影響不大；熏硫對半夏的浸出物、總生物堿、總酸含量均有顯著影響。通過加權評分法對不同加工方法的半夏藥材進行了評價，結果發(fā)現(xiàn)，以曬干半夏

4、的評分最高，其次是減壓干燥，熏硫處理的評分較低。
　?。?）在上述研究的基礎上，對半夏不同熏硫時間及熏硫后不同的干燥方法進行了研究，通過對半夏中二氧化硫殘留量的測定，結果發(fā)現(xiàn)，半夏中的二氧化硫殘留量隨著熏硫時間的延長而增加，且在熏硫時間>b h以后，二氧化硫殘留量超過了150mg/kg；另外，熏硫對半夏中的化學成分也有了一定的影響，總生物堿含量與熏硫時間的變化規(guī)律不明顯，總酸含量隨熏硫時間的升高有增加的趨勢；不同干燥方法對半夏中二

5、氧化硫的殘留量也存在影響，以熏后曬干處理的二氧化硫殘留量最低。
　?。?）對半夏HPLC指紋圖譜進行了系統(tǒng)研究，分別建立了熏硫與無硫半夏的HPLC指紋圖譜共有模式，并對熏硫與未熏硫半夏的HPLC指紋圖譜作了比較分析。通過對指紋圖譜的相似度分析表明，熏硫時間在 bh以內的圖譜與未熏硫半夏圖譜相似，熏硫時間大于 bh后，與未熏硫半夏圖譜相似度較低。
　　結合熏硫前后半夏藥材性狀特征、化學成分變化及二氧化硫殘留量進行分析發(fā)現(xiàn)，熏硫

6、時間小于bh時，半夏中化學成分雖有一定的變化，但無顯著性差異，且二氧化硫殘留量不超過國家規(guī)定的150mg/kg的標準，因此將半夏最佳加工方法確定為：以直接曬干最好，在某些陽光不充足的地區(qū)，半夏采挖后無法曬干時，可以適當?shù)倪M行熏硫處理，但是熏硫時間不得超過b h，該方法已申請專利1項。
　　2.對半夏種內變異情況進行了部分生物學特性、生長規(guī)律、細胞學、藥材質量等方面的初步研究，主要內容有：
　?。?）通過對半夏主葉長、主葉寬、

7、珠芽位置（珠芽至塊莖的長度）、地上部分（地上部分莖的長度）、株高、珠芽直徑、塊莖直徑等進行測定和統(tǒng)計分析顯示，半夏表型特征存在普遍的變異，其中葉形狀的變異最為明顯，按照葉形的不同將半夏分為芍藥葉型、桃葉型、竹葉型、柳葉型4種，其中芍藥葉型占的比例較大；其次是珠芽的著生位置、數(shù)量和塊莖形狀。
　?。?）對4種葉型半夏的生長節(jié)律進行了觀察，結果發(fā)現(xiàn)，除桃葉型半夏的珠芽發(fā)生時間略早外，芍藥葉型半夏和桃葉型半夏的生長規(guī)律都比較一致，竹葉型

8、半夏和柳葉型半夏出苗晚于芍藥葉型半夏和桃葉型半夏，竹葉、柳葉型半夏的珠芽發(fā)生時間與芍藥葉型半夏的相似。在整個生長過程中，4種葉型半夏均有2～3次倒苗，竹葉和柳葉型半夏的倒苗時間略晚于芍藥葉、桃葉型半夏；另外，4種葉型半夏的佛焰苞發(fā)生率和結實率均較低。
　?。?）從染色體數(shù)目、SDS-PAGE蛋白電泳、ISSR分子標記等方面對4種葉型半夏進行了遺傳多樣性分析。結果表明，4種葉型半夏在染色體數(shù)目、蛋白水平、分子水平上都存在一定的差異，

9、但通過分析發(fā)現(xiàn)，芍藥葉型半夏和桃葉型半夏在蛋白水平、分子水平上的遺傳距離比較接近，有較好的一致性。
　　（4）為研究不同葉型半夏在藥材質量上的差異，對不同葉型半夏藥材的外觀性狀、薄層色譜、總生物堿、總酸進行了測定，并對其HPLC指紋圖譜進行了比較分析。結果發(fā)現(xiàn)，不同葉型半夏的生物堿含量之間存在一定的差異，竹葉型半夏的總生物堿和總酸含量均較高，其次是芍藥葉型半夏、桃葉型半夏，柳葉型半夏的總生物堿和總酸含量均較低。通過化學指紋圖譜的相