不同價(jià)態(tài)砷對(duì)大鼠砷代謝及甲基化生化指標(biāo)的影響.pdf

1、目的：觀察不同價(jià)態(tài)、不同劑量砷染毒大鼠代謝相關(guān)生化指標(biāo)的活力及大鼠肝臟中甲基轉(zhuǎn)移酶mRNA的表達(dá)情況，尋找不同價(jià)態(tài)砷體內(nèi)代謝間的差異，為進(jìn)一步探討砷的毒作用機(jī)制提供依據(jù)。
　　 方法：選用Wistar 大鼠70 只，隨機(jī)分為對(duì)照組，對(duì)照組給予飲用去離子水，iAs3+高、中、低劑量組，分別給予20.0、6.7、2.2mg/kg的亞砷酸鈉溶液，iAs5+高、中、低劑量組，分別給予20.0、6.7、2.2mg/kg的砷酸氫鈉溶液，共7

2、 組。采用自由飲水法染毒，連續(xù)染毒90 d。大鼠飼養(yǎng)至第3個(gè)月末，用頸椎脫臼法處死。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)各組肝臟勻漿液中SAM，ARR，MTR的活力；酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血細(xì)胞中PK 活力；實(shí)時(shí)熒光定量PCR 測(cè)定各組肝臟基因組中甲基轉(zhuǎn)移酶mRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果：1.iAs3+和iAs5+均可升高大鼠肝臟中SAM 活力(P<0.05)，且隨著染砷劑量的增加，呈下降的趨勢(shì)，相同劑量iAs3+組SAM活力低于iAs

3、5+組，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；2.iAs3+和iAs5+可改變大鼠肝臟中的ARR 活力，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；iAs3+高、中劑量組與低劑量組比較，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，iAs5+高劑量組與低劑量組比較，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；iAs3+和iAs5+各劑量組間比較，差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；3.MTR 可改變iAs3+和iAs5+大鼠肝臟中的活力，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；

4、相同受試物與低劑量組比較，差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；iAs3+和iAs5+高劑量組間比較，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；iAs3+和iAs5+低劑量組比較，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；4.高劑量iAs3+和iAs5+可降低大鼠血清中PK 活性，iAs3+和iAs5+高劑量組中的比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05)，iAs3+和iAs5+在中劑量組與低劑量組比較時(shí)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p均>0.05)；5.從熒光定量PC

5、R的結(jié)果可見，iAs3+和iAs5+在大鼠肝臟中甲基化轉(zhuǎn)移酶mRNA的基因表達(dá)與正常對(duì)照組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05)，隨著染砷劑量的增加，iAs3+As3MT基因的mRNA 表達(dá)呈上升趨勢(shì)，iAs5+As3MT基因的mRNA 表達(dá)呈下降趨勢(shì)，iAs3+和iAs5+高劑量組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；隨著染砷劑量的增加，iAs3+DNMT3A，3B基因的mRNA 表達(dá)呈下降趨勢(shì)，iAs5+DNMT3A，3B基因的mRNA

6、 表達(dá)呈上升趨勢(shì)，iAs3+和iAs5+高、低劑量組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；DNMT1基因的mRNA 表達(dá)中iAs3+和iAs5+高、中劑量組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論：1.iAs3+和iAs5+均可使大鼠肝臟組織中SAM的含量升高，通過SAM提供充足的甲基供體，增強(qiáng)機(jī)體的甲基化代謝能力。2.iAs3+或iAs5+可影響ARR的活力，還原酶的活性將直接影響甲基化的進(jìn)程。3.iAs3+或iAs

7、5+染毒大鼠可改變MTR的活力，通過影響葉酸的正常代謝、細(xì)胞內(nèi)DNA 甲基化反應(yīng)以及脫氧核苷酸三磷酸鹽的生物合成，進(jìn)而影響砷的作用機(jī)制。4.長期攝入過量iAs3+或iAs5+可降低丙酮酸激酶的活力，通過糖酵解作用改變砷甲基化的程度。5.長期慢性染砷（iAs3+或iAs5+）可使As3MT的mRNA 表達(dá)升高，并存在劑量關(guān)系，影響砷的甲基化程度；iAs3+或iAs5+可在大鼠肝臟中抑制DNMTs基因的mRNA的表達(dá)，表明不同價(jià)態(tài)的砷可通過