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文檔簡介
1、目的:探討對乙酰氨基酚(4-Acetaminophen,APAP)對小鼠聽覺的損傷作用,及其可能的損傷機制,為臨床預(yù)防及減少因使用對乙酰氨基酚不當而引起的聽力下降提供實驗依據(jù)。
方法:1、建立對乙酰氨基酚致小鼠聽力損傷模型:將耳廓反應(yīng)靈敏的健康7周齡C57小鼠,體重20±2g,雌雄不分,隨機分為4組,分別為低 AP組(150mg/(kg·d)、中 AP組(300mg/(kg·d)、高AP組(600mg/(kg·d))組、空白對
2、照組,檢測每組于喂藥第0、2、4、9天后聽性腦干誘發(fā)電位(ABR)反應(yīng)閾;2、通過高效液相色譜法(HPLC)測定小鼠耳蝸內(nèi)淋巴液中對乙酰氨基酚藥物的濃度,并使用免疫熒光法觀測耳蝸基底膜內(nèi)毛細胞(IHCs)形態(tài)學(xué)變化。3、選取C57小鼠20只,分為正常組C57小鼠10只,給予灌胃0.2ml/天0.9%生理鹽水;實驗組C57小鼠10只,給予灌胃對乙酰氨基酚300mg/kg·天。2組小鼠灌胃3天后,行耳蝸急性分離并經(jīng)木瓜蛋白酶消化獲得活性良好
3、的IHCs,行全細胞膜片鉗技術(shù)記錄耳蝸IHCs電生理變化情況。
結(jié)果:1、使用對乙酰氨基酚灌胃30分鐘后,于C57小鼠耳蝸內(nèi)淋巴液中可檢測到對乙酰氨基酚,內(nèi)淋巴液中對乙酰氨基酚的藥物濃度與灌服劑量呈正相關(guān)。2、對乙酰氨基酚各組隨給藥時間延長,ABR聽閾增高。低、中、高劑量組給藥后9天聽閾平均閾值分別為低劑量組50±11dB;中劑量組44±16dB;高劑量組55±17dB,與空白對照組進行比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
4、3、隨灌服時間延長,對乙酰氨基酚各組免疫熒光鏡顯示毛細胞出現(xiàn)不同程度缺失。4、全細胞膜片鉗技術(shù)記錄實驗組內(nèi)毛細胞較正常組內(nèi)毛細胞鈣離子內(nèi)化電流減小,膜電容峰值及膜電容均降低。
結(jié)論:1、對乙酰氨基酚能透過血迷路屏障進入耳蝸內(nèi)淋巴液中,從而直接作用于耳蝸螺旋器(corti器),破壞其中的內(nèi)、外毛細胞生理功能;2、C57小鼠灌胃對乙酰氨基酚后,造成C57小鼠ABR閾值隨給藥濃度增加而提高,其損傷程度與使用劑量、時間呈正相關(guān)。耳蝸基
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