女貞子炮制工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究.pdf

1、本文采用溶劑和色譜方法對(duì)女貞子果實(shí)的80﹪乙醇提取物進(jìn)行了化學(xué)成分的分離和純化研究，從中分離得到特征性水溶性成分—特女貞苷約900mg，其中純度98﹪以上的約100mg，依據(jù)化學(xué)和波譜分析方法進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定。 女貞子臨床應(yīng)用多以炮制品入藥，且以酒制法為多。從1963年至2005年版《中國(guó)藥典》均記載女貞子為加黃酒拌勻燉法或蒸法。關(guān)于女貞子的酒制，全國(guó)各地在加酒量和時(shí)間上，差異很大。為此，采用正交實(shí)驗(yàn)方法，以齊墩果酸為含測(cè)指標(biāo)，加

2、酒量(A)、蒸制時(shí)間(B)和烘干溫度(C)為考察因素，對(duì)女貞子的炮制工藝進(jìn)行優(yōu)選。結(jié)果顯示：A因素和C因素有統(tǒng)計(jì)意義，B因素?zé)o統(tǒng)計(jì)意義。影響酒制關(guān)鍵因素是加酒量，其次是烘干溫度，結(jié)合外觀色澤以及各地區(qū)傳統(tǒng)炮制經(jīng)驗(yàn)，確立了其炮制工藝：黃酒加入量為20﹪，蒸制時(shí)間為4h，烘干溫度為70℃。將實(shí)驗(yàn)室工藝中試放大，進(jìn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究，建立飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為規(guī)范飲片炮制和有效市場(chǎng)監(jiān)控提供科學(xué)的依據(jù)。 建立了女貞子藥材及中試飲片中齊墩果酸和熊果

3、酸的HPLC測(cè)定方法，方法學(xué)考察表明：方法穩(wěn)定可靠，重現(xiàn)性好，齊墩果酸、熊果酸的回收率分別為98.64﹪和98.25﹪，RSD分別為0.46﹪和1.05﹪。含量測(cè)定表明：14個(gè)產(chǎn)地女貞子藥材齊墩果酸含量范圍在0.719﹪～1.579﹪，熊果酸含量范圍在0.176﹪～0.519﹪，齊墩果酸和熊果酸總量范圍在0.907﹪～2.086﹪。中試飲片齊墩果酸含量范圍在0.914﹪～1.640﹪，熊果酸含量范圍在0.285﹪～0.484﹪，齊墩果酸

4、和熊果酸總量范圍在1.199﹪～2.114﹪.齊墩果酸、熊果酸無論在化學(xué)結(jié)構(gòu)、色譜鑒別、分離條件和藥理作用上都比較相近。建議藥典在女貞子藥材標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下增加齊墩果酸和熊果酸總含量，規(guī)定總含量應(yīng)不得少于1.0﹪，飲片含量應(yīng)不得少于1.1﹪。 同時(shí)以特征性有效成分特女貞苷為指標(biāo)，建立女貞子藥材及中試飲片的HPLC測(cè)定方法，并進(jìn)行了方法學(xué)考察，特女貞苷的回收率為101.97﹪，RSD為1.37﹪。12個(gè)產(chǎn)地女貞子藥材中特女貞苷的含量范圍在

5、0.241﹪～4.451﹪之間，地區(qū)差異較大，這可能與樣品產(chǎn)地、采集時(shí)間、樣品初加工、樣品儲(chǔ)藏時(shí)間以及市售藥材產(chǎn)地混亂等因素有關(guān)。中試飲片中特女貞苷的含量范圍在0.260﹪～0.775﹪，與炮制藥材相比，特女貞苷的含量有所下降，這可能與炮制前水洗、蒸制時(shí)間過長(zhǎng)、烘干溫度以及特女貞苷(環(huán)烯醚萜結(jié)構(gòu))本身性質(zhì)等因素有關(guān)，建議(1)女貞子酒制，凈選后，黃酒伴勻，低溫干燥或直接干燥。(2)在女貞子藥材標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下增加特女貞苷含量，依據(jù)本課題主要產(chǎn)地

6、江蘇女貞子中特女貞苷的含量，暫定含量應(yīng)不得少于0.40﹪。(3)飲片依據(jù)本課題主要產(chǎn)地江蘇女貞子中特女貞苷的含量，暫定含量應(yīng)不得少于0.25﹪。 為了更好地監(jiān)控女貞子的質(zhì)量，又分別以女貞子中的有效成分多糖和甘露醇為指標(biāo)，建立了分光光度測(cè)定方法，并對(duì)藥材和中試飲片進(jìn)行了含量測(cè)定并進(jìn)行了穩(wěn)定性考察。結(jié)果顯示，炮制前后，含量變化不大。 此外，對(duì)女貞子藥材及飲片進(jìn)行了薄層色譜定性鑒別、水分、灰分、農(nóng)殘和重金屬測(cè)定，建議改進(jìn)《藥典

7、》女貞子項(xiàng)下齊墩果酸的薄層鑒別方法，增加特女貞苷的薄層鑒別方法，建議(1)藥材：水分限量規(guī)定為不得過8.0﹪，灰分限量規(guī)定為不得過5.0﹪，酸不溶灰分不得過0.50﹪，醇溶性浸出物不低于25.0﹪。(2)飲片：水分不得過5.5﹪，灰分不得過5.5﹪，酸不溶灰分不得過0.75﹪，醇溶性浸出物不得少于22.0﹪。 制定酒女貞子的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(草案)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)起草說明。對(duì)飲片進(jìn)行了6個(gè)月初步穩(wěn)定性研究，結(jié)果表明飲片在6個(gè)月內(nèi)相對(duì)穩(wěn)定。

8、 創(chuàng)新點(diǎn)：1.在傳統(tǒng)炮制工藝和生產(chǎn)實(shí)踐基礎(chǔ)上，研究確立了女貞子酒制工藝中的關(guān)鍵技術(shù)參數(shù)(加酒量，蒸制時(shí)間及烘干溫度)，為中藥飲片企業(yè)的大規(guī)?？煽鼗a(chǎn)提供了科學(xué)依據(jù)。2.分離鑒定了女貞子中特征性成分特女貞苷，得到純度98﹪以上的特女貞苷對(duì)照品100mg左右，純度95﹪以上特女貞苷對(duì)照品約800mg。3.建立了女貞子中齊墩果酸、熊果酸、特女貞苷、多糖、甘露醇的含量測(cè)定方法及一系列方法學(xué)考察。4.修訂、增補(bǔ)2005版《中國(guó)藥典》女貞子的