素馨花總環(huán)烯醚萜苷提取純化工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究.pdf

1、素馨花為木犀科茉莉?qū)僦参锼剀盎?Jasminum officinale L.var.grandiflorum)的干燥花蕾,又名素馨針、耶悉茗花,世界各地廣為栽培,具有疏肝解郁、行氣止痛之功效。我國(guó)民間用其治療消化不良、十二指腸球部潰瘍及慢性肝炎、肝硬化等癥。素馨花主要化學(xué)成分為環(huán)烯醚萜苷類(lèi)、黃酮類(lèi)和三萜皂苷類(lèi)化合物,其中環(huán)烯醚萜苷類(lèi)化合物主要為橄欖苦苷。近年來(lái),隨著國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)橄欖苦苷研究的不斷深入,發(fā)現(xiàn)其具有許多藥理活性,引起人們的廣

2、泛關(guān)注。橄欖苦苷具有抗VHSV、HIV、HBV等病毒的作用；抗腫瘤作用；抗氧化作用；降血糖作用；對(duì)心血管系統(tǒng)的作用；對(duì)物質(zhì)代謝的影響；抑菌活性和抗炎作用等一系列藥理活性。
　　 素馨花中總環(huán)烯醚萜苷為主要活性成分,總環(huán)烯醚萜苷主要為橄欖苦苷,橄欖苦苷是一種苯酚類(lèi)裂環(huán)烯醚萜苷,橄欖苦苷易溶于乙醇、丙酮、吡啶等,可溶于水、丁醇、乙酸乙酯,幾乎不溶于乙醚、石油醚、氯仿等。目前為止國(guó)內(nèi)外還未有關(guān)于素馨花中總環(huán)烯醚萜苷提取分離純化工藝優(yōu)化

3、的文獻(xiàn)報(bào)道,故本研究擬先采用正交試驗(yàn)法對(duì)素馨花中總環(huán)烯醚萜苷提取工藝進(jìn)行優(yōu)選并制定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),再以聚酰胺樹(shù)脂為固定相,選擇適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相,應(yīng)用常壓柱色譜分離純化素馨花藥材總環(huán)烯醚萜苷中的橄欖苦苷,旨在探索一種快速提取、分離和純化素馨花藥材有效成分的簡(jiǎn)單實(shí)用方法并最終確定最佳的提取分離純化工藝,本研究還擬制定總環(huán)烯醚萜苷和橄欖苦苷的含量測(cè)定方法及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。為素馨花藥材的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用及其總環(huán)烯醚萜苷的生物活性研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ),為之后的藥理活性

4、實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。
　　 第一部分素馨花總環(huán)烯醚萜苷提取工藝的研究
　　 目的:
　　 研究素馨花中總環(huán)烯醚萜苷的最佳提取工藝。
　　 方法:
　　 以橄欖苦苷作為對(duì)照品,通過(guò)紫外分光光度法測(cè)定總環(huán)烯醚萜苷的含量,計(jì)算總環(huán)烯醚萜苷收率(按藥材計(jì)算)為評(píng)價(jià)指標(biāo),采用L9(34)正交實(shí)驗(yàn)法對(duì)水冷浸、水煎煮、醇冷浸、醇回流的各個(gè)因素進(jìn)行考察。
　　 結(jié)果:
　　 水冷浸最佳條件為A383C3

5、,即用12倍量蒸餾水冷浸提取3次,每次72h；水煎煮最佳條件為A3B1C3,即用16倍量蒸餾水煎煮3次,每次1h；醇冷浸最佳條件為A2B1C3,即用12倍量60％乙醇冷浸提取3次,每次48h；醇回流最佳條件為A3B3C1,即用12倍量60％乙醇回流提取3次,每次2h。各種方法的最優(yōu)組合所得的總環(huán)烯醚萜苷收率差別不大。
　　 結(jié)論:
　　 用12倍量60％乙醇冷浸提取3次(每次48小時(shí))的提取方法可以獲得較高的提取率,并且

6、穩(wěn)定可行。該研究考察的提取工藝具有良好的穩(wěn)定性和重復(fù)性,可為素馨花藥材的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。
　　 第二部分素馨花中橄欖苦苷純化工藝的研究
　　 目的:
　　 研究素馨花中橄欖苦苷的純化工藝及結(jié)構(gòu)鑒定。
　　 方法:
　　 用聚酰胺樹(shù)脂富集純化總環(huán)烯醚萜苷,即以聚酰胺為分離載體,樣品液濃度為1g／ml,上樣量為干浸膏(g)／聚酰胺(g)=1:10,上樣后靜態(tài)吸附1h,先用2BV蒸餾水洗脫除

7、雜,再用15％乙醇溶液洗脫,以高效液相色譜法測(cè)定橄欖苦苷含量。測(cè)定橄欖苦苷的1HNMR、13CNMR、MS等波譜圖,根據(jù)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)確定橄欖苦苷的結(jié)構(gòu)。
　　 結(jié)果:
　　 用高效液相色譜法測(cè)定所得干浸膏中橄欖苦苷的含量占總量的80％以上。用聚酰胺制備板得到橄欖苦苷純品,可用于結(jié)構(gòu)鑒定。根據(jù)理化性質(zhì)和IR、HNMR、CNMR、MS等波普數(shù)據(jù)確定橄欖苦苷的結(jié)構(gòu)。
　　 結(jié)論:
　　 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)不斷地預(yù)

8、實(shí)驗(yàn)確定以聚酰胺為分離介質(zhì),富集純化素馨花中總環(huán)烯醚萜苷及橄欖苦苷的工藝,為以后素馨花藥材藥理活性的研究奠定了基礎(chǔ)。
　　 第三部分素馨花總環(huán)烯醚萜苷提取物質(zhì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案
　　 目的:
　　 研究素馨花中總環(huán)烯醚萜苷和橄欖苦苷的含量測(cè)定方法及制定素馨花總環(huán)烯醚萜苷提取物質(zhì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案。
　　 方法:
　　 采用顏色反應(yīng)、薄層色譜法進(jìn)行鑒別,建立了紫外分光光度法測(cè)定總環(huán)烯醚萜苷含量和高效液相色譜法測(cè)

9、定橄欖苦苷含量的分析方法。
　　 結(jié)果:
　　 建立了紫外分光光度法測(cè)定總環(huán)烯醚萜苷含量和高效液相色譜法測(cè)定橄欖苦苷含量的分析方法?？偔h(huán)烯醚萜苷的標(biāo)準(zhǔn)曲線為:A=0.0289 C-0.0049(R2=0.9998),3.96-19.80μg／mL的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,平均回收率值為102.64％,RSD=0.65％(n=6)。橄欖苦苷的標(biāo)準(zhǔn)曲線為Y=133959x+23.44(R2=0.9998)0.02-0.10mg／