一種新的促進體外培養(yǎng)肝細胞活性及增殖的方法.pdf

1、體外肝細胞培養(yǎng)是生物制藥和人工肝支持系統(tǒng)的技術基礎。體外培養(yǎng)肝細胞的活性低、增殖能力差一直是制約其發(fā)展的瓶頸問題，怎樣提高肝細胞活性及增殖能力是目前研究的熱點。本課題將中藥黃芪（AM）、當歸（AN）與體外肝細胞培養(yǎng)相結合，研究其對肝細胞形態(tài)及生理功能的影響，目前這方面的研究少見報道。并且首次以血清藥理學方法研究了兩者的不同比例對肝細胞的形態(tài)及生理功能的影響，為進一步提高體外培養(yǎng)肝細胞活性及得率提供實驗依據，以及為臨床肝病治療提供新的藥物

2、。 研究含藥血清對細胞形態(tài)及生理功能的影響：分別給日本大耳白兔灌胃AM、AN以及不同比例的AMAN合劑，制備對照血清及含藥血清，以制備的血清培養(yǎng)被H2O2氧化的L02細胞，以全自動生化檢測儀測定Alb及ALT含量，以3H-TdR摻入法和MTT法測定L02細胞增殖情況，透射電鏡觀察細胞微結構的變化，得到以下結論：(1) AM與AN比例為3：1時Alb分泌明顯增加(P<0.01)、ALT含量明顯降低(P<0.01)。結果提示AM與A

3、N比例為3：1時促進L02細胞分泌功能，提高細胞膜穩(wěn)定性；(2) 透射電鏡觀察：AM與AN比例為3：1組細胞器豐富,以粗面內質網和線粒體為主，少見凋亡小體，是促進L02細胞的分泌功能及抑制凋亡的形態(tài)學基礎。(3) AM與AN比例為3：1組OD值與CPM值明顯增加(P<0.05)，提示AM與AN比例為3：1時L02細胞的增殖能力明顯增加。 研究AMAN對L02細胞增殖能力影響的機制：采用免疫組織化學染色(SABC法)測定AM與AN