不同保存期紅細(xì)胞對(duì)心臟手術(shù)患者負(fù)性作用及其相關(guān)機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　本研究通過(guò)回顧性病例分析探尋陳舊紅細(xì)胞輸注對(duì)體外循環(huán)冠脈搭橋患者術(shù)后結(jié)局的影響,并在此基礎(chǔ)上,分別從細(xì)胞水平、亞細(xì)胞水平和代謝組學(xué)角度探索不同保存期懸浮紅細(xì)胞上清對(duì)心肌細(xì)胞的作用及其發(fā)生機(jī)制,為進(jìn)一步明確陳舊紅細(xì)胞功能變化、規(guī)避陳舊紅細(xì)胞輸注導(dǎo)致的不良后果、提高臨床紅細(xì)胞治療效果提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　1.將住院期間術(shù)后常見(jiàn)嚴(yán)重并發(fā)癥作為主要觀察指標(biāo)并定義為“惡性結(jié)局”,按“惡性結(jié)局”發(fā)生與否將22

2、1名體外循環(huán)冠脈搭橋患者分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,巢式病例對(duì)照研究方法將樣本按照性別、年齡和體外循環(huán)時(shí)間以1:3比例匹配,條件 logistic回歸方法分析紅細(xì)胞保存時(shí)間是否是影響體外循環(huán)冠脈搭橋患者預(yù)后的主要因素。
　　2.采集6人份18-20歲男性合格獻(xiàn)血員血液標(biāo)本2U,制成懸浮紅細(xì)胞,分別在庫(kù)存0、7、14、21、28和35d時(shí)離心留取上清,將不同保存期懸浮紅細(xì)胞上清按大劑量輸血比例(10U)與SD乳鼠心肌細(xì)胞共培養(yǎng),分別在作用0

3、.5h、3h、6h和24h觀察心肌細(xì)胞搏動(dòng)性。
　　3.模擬陳舊懸浮紅細(xì)胞上清中鉀離子濃度并探討其對(duì)心肌細(xì)胞搏動(dòng)性影響;不同保存期懸浮紅細(xì)胞上清與心肌細(xì)胞作用24h時(shí),檢測(cè)心肌細(xì)胞胞內(nèi)活性氧水平,并對(duì)其進(jìn)行細(xì)胞骨架和線粒體膜電位染色;核磁共振技術(shù)檢測(cè)不同保存期懸浮紅細(xì)胞上清的代謝組學(xué)改變。
　　結(jié)果：
　　1.平均紅細(xì)胞保存時(shí)間與“惡性結(jié)局”的發(fā)生有顯著相關(guān)性,平均紅細(xì)胞保存時(shí)間每增加一天,發(fā)生“惡性結(jié)局”的風(fēng)險(xiǎn)就增加

4、1.2倍(95％CI:1.032-1.401, p=0.018)。
　　2.當(dāng)紅細(xì)胞上清與心肌細(xì)胞作用3h時(shí),保存14天或更陳舊的紅細(xì)胞上清可導(dǎo)致部分心肌細(xì)胞停搏,其中14天組停搏率達(dá)27.8%,35天組44.4%;反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng)到6h時(shí),7天及以后的紅細(xì)胞上清均導(dǎo)致心肌細(xì)胞不同程度停止搏動(dòng),其差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.001)。
　　3.模擬陳舊紅細(xì)胞鉀離子濃度并未造成心肌細(xì)胞停搏,陳舊懸浮紅細(xì)胞上清作用的心肌細(xì)胞其 RO

5、S表達(dá)、細(xì)胞骨架和線粒體膜電位變化較新鮮紅細(xì)胞組均未發(fā)現(xiàn)顯著差別。核磁共振代謝組學(xué)研究發(fā)現(xiàn),隨懸浮紅細(xì)胞保存時(shí)間的延長(zhǎng),樣本中纈氨酸/亮氨酸/異亮氨酸、乳酸和丙氨酸含量升高,而枸櫞酸和糖類(lèi)含量顯著下降,且變化具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.陳舊紅細(xì)胞輸注可顯著影響體外循環(huán)冠脈搭橋患者短期預(yù)后,此類(lèi)患者圍術(shù)期應(yīng)盡量輸注新鮮紅細(xì)胞。
　　2.保存期大于14天的懸浮紅細(xì)胞上清可不同程度導(dǎo)致體外SD大鼠心