重組類(lèi)人膠原蛋白Ⅱ仿生人工骨材料的制備及相關(guān)性能研究.pdf

1、隨著組織工程，特別是骨組織工程的迅速發(fā)展，仿生人工骨材料日益受到人們的關(guān)注。作為骨的主要有機(jī)成分，膠原蛋白不僅是成骨細(xì)胞附著的支架，而且對(duì)礦物沉積具有重要的誘導(dǎo)作用，因此成為骨組織工程領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。重組類(lèi)人膠原蛋白Ⅱ(recombinant human.1ike collagen Ⅱ，RHLC Ⅱ)是一種由人膠原基因的mRNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA后重組入大腸桿菌，經(jīng)高密度發(fā)酵而成的蛋白，消除了動(dòng)物源膠原蛋白病毒隱患的制約，并且具有成本低、

2、能夠產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的特點(diǎn)，具有極高的應(yīng)用價(jià)值和市場(chǎng)前景。支架材料的構(gòu)建是對(duì)RHLC Ⅱ應(yīng)用于骨組織工程必不可少的物質(zhì)基礎(chǔ)。本文從仿生學(xué)角度出發(fā)，采用相分離.冷凍干燥法制備RHLC Ⅱ仿生人工骨材料，并對(duì)其理化性能和生物相容性進(jìn)行初步研究。 1.以RHLC Ⅱ?yàn)橹饕?，利用相分離.冷凍干燥法制備RHLC Ⅱ仿生人工骨材料。通過(guò)孔隙率實(shí)驗(yàn)、掃描電鏡、透射電鏡、X射線衍射儀、傅立葉紅外光譜儀以及萬(wàn)能電子材料試驗(yàn)機(jī)對(duì)材料的理化性能進(jìn)行檢測(cè)

3、。測(cè)定結(jié)果如下：①孔隙率大于85％；②孔徑介于60～300 p m之間，孔洞相互貫通；③羥基磷灰石晶體處于納米級(jí)(直徑為20~30hm，)；④無(wú)機(jī)相為結(jié)晶度較低的羥基磷灰石，無(wú)其它Ca-P鹽；⑤材料主要由膠原和碳酸化的羥基磷灰石組成，而且羥基磷灰石與殼聚糖分子間存在化學(xué)作用；⑥抗壓強(qiáng)度和彈性模量介于致密骨和牙本質(zhì)之間。表明該復(fù)合材料與天然骨組織的結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成極其相似，而且其孔徑范圍、孔隙率大小和力學(xué)性能參數(shù)也滿足骨修復(fù)材料的要求。

4、 2.依據(jù)ISO 10993-1992和GB/T 16886.1997的醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和要求，本文選擇急性全身毒性試驗(yàn)、溶血試驗(yàn)、皮內(nèi)刺激反應(yīng)試驗(yàn)和熱原試驗(yàn)對(duì)RHLC Ⅱ仿生人工骨材料的生物安全性和生物相容性進(jìn)行評(píng)價(jià)。試驗(yàn)結(jié)果均呈陰性：①材料組動(dòng)物未見(jiàn)明顯的毒性表現(xiàn)；②材料的溶血率為2.93％(<5％)；③材料的平均原發(fā)刺激指數(shù)為0.27分(<0.4分)；④3只試驗(yàn)動(dòng)物體溫升高的度數(shù)均低于0.6℃，且體溫升高總數(shù)低于1.4℃