吡格列酮對(duì)大鼠腦出血后AQP4表達(dá)的影響.pdf

1、中文摘要目的觀察吡格列酮對(duì)大鼠腦出血后A Q P 4 表達(dá)的影響，探討吡格列酮對(duì)大鼠腦出血后神經(jīng)保護(hù)作用。方法將3 6 只成年雄性W i s t a r 大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、腦出血組、吡格列酮組，每組1 2 只。建立大鼠白體血腦出血模型，模型成功后，吡格列酮組大鼠分別于術(shù)后即刻、術(shù)后2 4 小時(shí)、術(shù)后4 8 小時(shí)給予吡格列酮( 2 ．5 m g ／k g ) 灌胃，假手術(shù)組及腦出血組則給予同量生理鹽水灌胃。每組末次給藥2 4 小時(shí)后處

2、死大鼠，半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)( r e v e r s et r a n s c r i p t i o n —p o l y r m e r a s ec h a i n r e a c t i o n ，R T —P C R )檢測(cè)腦組織A Q P 4 m R N A 的表達(dá)，W e s t e r n —b l o t 檢測(cè)腦組織A Q P 4 蛋白的表達(dá)。結(jié)果R T —P C R 顯示，假手術(shù)組A Q P 4 m R N A

3、 含量( 0 ．3 5 0 8 ±0 ．0 4 1 3 ) 最低，腦出血組A Q P 4 m R N A 含量( 0 ．8 5 3 6 ±0 ．0 3 7 1 ) 較假手術(shù)組明顯增高( P = O ．0 0 ，P < O ．0 5 ) ；吡格列酮組A Q P 4 m R N A 含量( 0 ．7 9 5 0 ±0 ．0 2 8 6 ) 與腦出血組相比明顯降低( P = 0 ．0 3 ，P < O

4、 ．0 5 ) 。W e s t e r n —b l o t 顯示腦出血組A Q P 4 蛋白相對(duì)含量( 0 ．9 8 2 7 ±0 ．0 9 4 7 ) 最高，較假手術(shù)組( 0 ．4 7 7 3 ±0 ．0 4 6 7 ) 明顯升高( P = O ．0 0 ，P < O ．0 5 ) ，而吡格列酮組A Q P 4蛋白相對(duì)含量( 0 ．7 9 7 2 ±0 ．0 5 1 5 ) 介于二者之間，較腦出

5、血組明顯降低( P = 0 ．0 0 ，P < O ．0 5 ) 。結(jié)論吡格列酮能夠抑制大鼠腦出血后血腫周?chē)X組織A Q P 4 的表達(dá)。吡格列酮可能通過(guò)抑制腦出血后A Q P 4 的表達(dá)而減輕腦水腫，起到神經(jīng)保護(hù)作用。碩士研究生李述衛(wèi)( 神經(jīng)病學(xué))指導(dǎo)老師 王海萍副教授關(guān)鍵詞：吡格列酮；腦出血；A Q P 4 ；大鼠；W i s t a r目錄引言??????????????????????????????????1第一章實(shí)驗(yàn)材

6、料????????????????????????????一31 ．1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物??????????????????????????????。31 ．2 實(shí)驗(yàn)器械及材料???????????????????????????‘31 ．3 主要實(shí)驗(yàn)儀器????????????????????????????‘31 ．4 主要實(shí)驗(yàn)試劑????????????????????????????·41 ．5 P C R 引物設(shè)計(jì)合成???

7、???????????????????????‘4第二章研究方法????????????????????????????一52 ．1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組????????????????????????????·52 ．2 動(dòng)物模型制作及藥物干預(yù)方法?????????????????????·52 ．2 ．1 腦出血模型制作?????????????????????????52 ．2 ．2 神經(jīng)功能評(píng)分及藥物干預(yù)方法????

8、???????????????62 ．2 ．3 給藥方法????????????????????????????62 ．3 標(biāo)本取材??????????????????????????????·62 ．4 R T - P C R 檢測(cè)大鼠腦組織中A Q P 4 m R N A 的表達(dá)???????????????·62 ．4 ．1 總R N A 的提取??????????????????????????62 ．4 ．

9、2 逆轉(zhuǎn)錄合成c D N A 第一鏈?????????????????????·72 ．4 ．3 R T —P C R ??????????????????????????????????????82 ．5 W e s t e r - b l o t 檢測(cè)大鼠腦組織中A Q P 4 蛋白的表達(dá)?????????????92 ．5 ．1 腦組織總蛋白的提取???????????????????????92 ．5 ．2 W e s