吡格列酮對2型糖尿病大鼠腎臟雷帕霉素靶蛋白表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:①觀察糖尿病組及吡格列酮干亟組大鼠空腹血糖、胰島素、甘油三酯、膽固醇、尿微量白蛋白、尿素氮、肌酐的變化。②探討PPAR-γ激動劑吡格列酮對糖尿病大鼠腎臟mTOR表達的影響。
   方法:體質(zhì)量為(200±20)g的8周齡健康清潔級SD雄性大鼠33只,隨機分成2組,正常對照組(A組)11只,糖尿病模型組22只。A組給予正常普通飲食,糖尿病模型組給予高糖高脂飲食造模,喂養(yǎng)4周,按照HOMA胰島素抵抗指數(shù)[HOMA=(FPG×F

2、NS)/22.5]判斷動物出現(xiàn)胰島素抵抗,本實驗HOMA統(tǒng)計結(jié)果為(16.3±2.74)mmol·mU/L2,將鏈脲佐菌素(STZ)按30mg/kg體質(zhì)量一次性腹腔注射,正常對照組腹腔內(nèi)注射等體積檸檬酸緩沖液。1周后,尾靜脈采血,血糖儀測定空腹血糖(采血前大鼠禁食12h),以空腹血糖≥13.9 mmol/L作為糖尿病造模成功標準。將造模成功的糖尿病大鼠隨機分成2組,即糖尿病模型組B組、吡咯列酮干預組C組,A、B組給予生理鹽水灌胃(2ml

3、/kg.d),C組給予吡格列酮(10mg/kg.d)灌胃給藥,飼養(yǎng)6周。大鼠自實驗結(jié)束前一日收集24小時尿標本,用于測定尿微量白蛋白;最后處死大鼠采血,用于測定血糖、血胰島素、膽固醇、甘油三脂、尿素氮、肌酐;摘取腎臟,一個腎用4%中性多聚甲醛固定,行HE染色行形態(tài)學檢查及免疫組化觀察mTOR蛋白水平的變化;另一個腎組織保存于-80℃冰箱,用于測定mTOR mRNA的表達。
   結(jié)果:⑴各組大鼠實驗室指標:與A組比較,B、C組大

4、鼠FBG、FNS、HOMA-IR、TG、TC水平均明顯升高(P<0.05),與B組比較,C組大鼠FBG、FNS、HOMA-IR、TG、TC水平均明顯降低(P<0.05)。⑵腎功能:各組大鼠BUN、Cr、UAlb比較:與A組比較,B、C組大鼠BUN、UAlb升高(P<0.01),B組Cr升高(P<0.05),A、C組Cr水平無明顯差異,與B組比較,C組大鼠BUN、Cr、UAlb降低(P<0.05)。⑶HE染色:A組大鼠腎組織病理結(jié)構(gòu)基本正

5、常,B組大鼠腎小管上皮細胞可見玻璃樣變和無結(jié)構(gòu)紅染物質(zhì),局灶區(qū)域可見腎小管液化壞死,腎小球囊內(nèi)可見少量紅細胞滲出,腎小球基底膜增厚,細胞外基質(zhì)增多,C組較B組病變減輕。⑷免疫組織化學染色結(jié)果:各組大鼠在腎小管、腎小球中均可見mTOR表達呈棕色顆粒樣物,與A組比較,B、C組大鼠腎組織mTOR表達明顯升高(P<0.01);與B組比較,C組大鼠腎組織mTOR表達明顯降低(P<0.05)。⑸基因表達:與A組比較,B、C組大鼠腎組織mTORmRN

6、A表達強度增強(P<0.05);與B組比較,C組大鼠腎組織mTOR mRNA表達強度減弱(P<0.05)。⑹尿微量白蛋白與mTOR的表達密切相關(guān),r=0.71(P<0.01)。
   結(jié)論:①糖尿病組大鼠空腹血糖、胰島素、甘油三酯、膽固醇、尿微量白蛋白、尿素氮、肌酐水平增加,吡格列酮干預后能降低各項生化指標(肌酐除外)。②糖尿病組大鼠腎臟組織mTOR表達比正常組表達增強,吡格列酮干預后,腎臟組織mTOR的表達減弱。③吡格列酮能改

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