2D和3D培養(yǎng)條件下腫瘤細(xì)胞缺氧環(huán)境模擬的初步研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2 0 1 0 級碩士學(xué)位論文2 D 和3 D 培養(yǎng)條件下腫瘤細(xì)胞缺氧環(huán)境模擬的初步研究A p r e l i m i n a r ys t u d yo f m i m i c h y p o x i c e n v i r o n m e n ti nt u m o rc e l l sc u l t u r e d u n d e r2 D a n d3 D c o n d i t i o n s課題來源：自選課題學(xué)位

2、申請人 王永魁導(dǎo) 師 姓 名 邱小忠教授專 業(yè) 名 稱 人體解剖與組織胚胎學(xué)培 養(yǎng) 類 型 學(xué)術(shù)型培 養(yǎng) 層 次 碩士所 在 學(xué) 院 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院2 0 1 3 年5 月2 日 廣州摘要氧誘導(dǎo)的人膠質(zhì)瘤U 2 5 1 細(xì)胞B N I P 3 基因表達(dá)上調(diào)能促使細(xì)胞發(fā)生凋亡。缺氧誘導(dǎo)高表達(dá)的B N I P 3 蛋白通過抑制m T O R 通路的活性來增強懸浮培養(yǎng)的肝癌細(xì)胞的自我吞噬能力，從而加速肝癌細(xì)胞的凋亡。然而另有許多研究者認(rèn)為B N

3、I P 3和N i x 能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長，對腫瘤細(xì)胞起保護(hù)作用。與正常乳腺組織相比，乳腺癌組織B N I P 3 和N i x m R N A 表達(dá)水平明顯增高。在實質(zhì)性腫瘤內(nèi)部缺氧區(qū)域，高表達(dá)的B I I P 3 蛋白并不與細(xì)胞的凋亡共存。而當(dāng)敲除B N I P 3 和N i x 基因后，腫瘤細(xì)胞受缺氧誘導(dǎo)發(fā)生凋亡。這就意味著N i x 在腫瘤發(fā)展進(jìn)程中似乎扮演著一個雙刃劍的角色，它在調(diào)控腫瘤生物學(xué)行為方面的作用尚存在分歧。核內(nèi)轉(zhuǎn)

4、錄因子N F ．r d 3 的異常表達(dá)與人體免疫，炎癥以及腫瘤的發(fā)生發(fā)展、侵襲、轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)。目前已闡明活化的N F ．1 0 B 可以促進(jìn)腫瘤生長，阻斷N F ．r , B的活化可抑制腫瘤細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其凋亡。當(dāng)腫瘤組織直徑達(dá)到4 0 0 9 m 時，其內(nèi)部即可形成缺氧區(qū)域，缺氧誘導(dǎo)因子( H I F ) 表達(dá)上調(diào)，進(jìn)而激活核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子N F ．1 ( B 信號傳導(dǎo)通路，腫瘤細(xì)胞自身產(chǎn)生促炎介質(zhì)，最終使腫瘤細(xì)胞適應(yīng)缺氧環(huán)境。腫瘤缺氧

5、微環(huán)境中，激活的N F ．r d 3 調(diào)控細(xì)胞凋亡信號途徑，使腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生耐腫瘤藥物和抗電離輻射的能力，進(jìn)而降低腫瘤細(xì)胞死亡的危險。人類惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織中N F ．K B 處于持續(xù)激活狀態(tài)，它參與膠質(zhì)瘤廣泛的生命活動，包括腫瘤細(xì)胞的生長、抗凋亡、血管生成、腫瘤侵襲及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。N F ．K ：B可調(diào)控多種凋亡抑制因子如c ．I A P l 、c ．I A P 2 的表達(dá)，還可以通過與腫瘤抑制劑蛋白如p 5 3 等相互作用實現(xiàn)抗腫瘤細(xì)胞凋

6、亡功能。然而在影響腫瘤發(fā)生發(fā)展的分子機制研究方面，尚無相關(guān)文獻(xiàn)報道N F ．r , B 活性和促凋亡蛋白N i x 之間的關(guān)聯(lián)性。目前腫瘤研究大多依賴2 D ( 二維) 培養(yǎng)系統(tǒng)，但是該體系不能很好的模擬體內(nèi)實體腫瘤的微環(huán)境，而且所得的研究結(jié)果也并不能完全體現(xiàn)體內(nèi)實體腫瘤的真實性。另外通過在小動物體內(nèi)注射腫瘤細(xì)胞或者移植腫瘤組織的方法建立的動物腫瘤模型已經(jīng)得到大多數(shù)研究學(xué)者的認(rèn)可，這也是目前進(jìn)行腫瘤研究的一個金標(biāo)準(zhǔn)。然而動物腫瘤模型有一