Vero細(xì)胞培養(yǎng)流感病毒的研究.pdf

1、流行性感冒是人類至今尚不能有效控制的傳染病之一，其特點(diǎn)是在短期內(nèi)突然爆發(fā)，迅速蔓延，造成不同程度的流行。除感染人外，流感病毒在動(dòng)物體內(nèi)也廣泛存在并能引起豬、雞、馬等動(dòng)物發(fā)病，導(dǎo)致動(dòng)物的大量死亡。雖然有少數(shù)抗病毒藥物對(duì)流感病毒的感染有一定療效，但并不能完全消除流感病毒給人類造成的威脅，因此疫苗接種仍然是預(yù)防流感的有力措施。目前，WHO積極支持和鼓勵(lì)以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為基質(zhì)生產(chǎn)流感疫苗，本實(shí)驗(yàn)對(duì)WHO指定的2006～2007年度疫苗株在 Ver

2、o細(xì)胞系上的增殖情況進(jìn)行了考察，為研制以細(xì)胞為基質(zhì)的流感疫苗提供了參考依據(jù)。第一部分不同類別的流感病毒毒株在Veto細(xì)胞上的傳代2006～2007年度WHO指定的北半球生產(chǎn)流感疫苗所用的標(biāo)準(zhǔn)毒株有三個(gè)型別，本實(shí)驗(yàn)中，三個(gè)型別的流感病毒疫苗株被分別接種到144代Vero細(xì)胞上并在適合于流感病毒繁殖的最優(yōu)化條件下進(jìn)行培養(yǎng)，三天之后收獲細(xì)胞裂解液，測(cè)定其血凝滴度，之后將第一代收獲的病毒液繼續(xù)接種Vero細(xì)胞，進(jìn)行連續(xù)傳代，發(fā)現(xiàn)病毒收獲液的血凝

3、效價(jià)隨著傳代次數(shù)的增加而逐漸降低，當(dāng)連續(xù)接種傳代四次之后，細(xì)胞裂解液中已經(jīng)檢測(cè)不到流感病毒了。上述的實(shí)驗(yàn)證明了WHO指定的疫苗生產(chǎn)用流感毒株在Vero細(xì)胞上適應(yīng)性差，不能有效繁殖，所以如果要利用Vero細(xì)胞作為基質(zhì)來(lái)生產(chǎn)流感疫苗，還需要從其他方面進(jìn)行探索和改進(jìn)。 第二部分微載體培養(yǎng)Yero細(xì)胞及培養(yǎng)H3N2型流感病毒Yero細(xì)胞適應(yīng)株的探索,微載體細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是一種微載體與生物反應(yīng)器結(jié)合的技術(shù)，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于生物工程領(lǐng)域，成為大