限制性液體復(fù)蘇對(duì)失血性休克大鼠腸粘膜及血漿TNF-α、IL-2的影響.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立失血性休克動(dòng)物模型，觀察不同液體復(fù)蘇的狀態(tài)下，小腸粘膜損傷程度，以及血清中TNF-α，IL-2水平的變化，探討不同液體復(fù)蘇對(duì)腸粘膜以及炎癥因子影響，為失血性休克患者采用液體復(fù)蘇的方式提供進(jìn)一步的理論依據(jù)。
　　 方法：Sprague-Dawley大鼠55只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組(n=10)、限制補(bǔ)液組(n=15)、常規(guī)補(bǔ)液組(n=15)、休克組(n=15)。對(duì)照組動(dòng)物僅做穿刺頸動(dòng)脈、頸靜脈，給予插管但不放血，并

2、且觀察120min。其他三組動(dòng)物頸動(dòng)靜脈插管后從頸動(dòng)脈以每分鐘0.2mL／100g的速率放血，使MAP在15min內(nèi)降至40～45mmHg，然后根據(jù)血壓的變化放出或回輸少量血液以繼續(xù)維持MAP在40～45mmHg之間15min，制作失血性休克動(dòng)物模型。在制造休克模型成功后，限制補(bǔ)液組、常規(guī)補(bǔ)液組分別經(jīng)頸靜脈輸入乳酸林格液維持MAP在60mmHg和90mmHg，并繼續(xù)維持30min，而休克組不給予輸入任何液體,然后在試驗(yàn)的60min后除對(duì)

3、照組外均用乳酸林格液與全血按2：1的體積比進(jìn)行充分復(fù)蘇并繼續(xù)維持大鼠血壓在休克前水平的90％，并且持續(xù)60min。四組均于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始的0min，60min．120min分別由頸動(dòng)脈置管處抽取1mL血液，注入普通管，3000r/min離心5min后取血清，然后采用ELISA法分別測(cè)定血清中TNF-a，以及IL-2的含量，并于試驗(yàn)120min時(shí)處死動(dòng)物，無(wú)菌操作下開(kāi)腹，距回腸瓣5cm處取回腸4cm，生理鹽水洗凈，用10％甲醛固定，常規(guī)取材制片

4、，HE以及PAS染色，光鏡下觀察病理變化。
　　 結(jié)果：本實(shí)驗(yàn)中，除對(duì)照組外其余各組在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后60min血清TNF-a，以及IL-2水平較前均有明顯升高(P<0.05)。在實(shí)驗(yàn)120min時(shí)休克組血清TNF-a，以及IL-2水平明顯高于其它各組（P<0.05)，常規(guī)補(bǔ)液組兩種因子均高于限制補(bǔ)液組以及對(duì)照組(P<0.05)，而限制補(bǔ)液組TNF-a，以及IL-2平高于對(duì)照組(P<0.05)。小腸組織光鏡病理觀察結(jié)果顯示：對(duì)照組大鼠

5、小腸粘膜基本正常，僅少數(shù)出現(xiàn)絨毛上皮輕度受損，其余三組均有不同程度的絨毛膜損傷，其中以休克組損傷最為嚴(yán)重，鏡下可見(jiàn)絨毛兩側(cè)有上皮層與固有層大量分離、絨毛破損伴固有層毛細(xì)血管暴露及中性粒細(xì)胞增多及固有層破壞、出血和潰瘍等，在兩種液體復(fù)蘇組中，限制補(bǔ)液組的腸黏膜損傷程度明顯小于常規(guī)補(bǔ)液組，限制補(bǔ)液組鏡下可見(jiàn)絨毛頂端上皮下間隙增大、上皮下間隙擴(kuò)展，少數(shù)為絨毛破損伴有固有層的破壞等，而常規(guī)補(bǔ)液組鏡下結(jié)果兼于限制補(bǔ)液組與休克液組之間。在Chiu氏

6、分級(jí)中，對(duì)照組損傷級(jí)別明顯低于其它三組(P<0.05)，而休克組損傷級(jí)別明顯高于其它三組（P<0.05)，在兩種液體復(fù)蘇組之間，常規(guī)補(bǔ)液組損傷級(jí)別高于限制補(bǔ)液組(P<0.05)。
　　 結(jié)論：不同液體復(fù)蘇可有效減輕失血性休克大鼠早期小腸組織腸粘膜損傷程度，并且減輕大鼠全身炎癥反應(yīng)；限制性液體復(fù)蘇相對(duì)于常規(guī)液體復(fù)蘇對(duì)失血性休克大鼠早期腸粘膜屏障功能的保護(hù)作用，并且減輕全身炎癥反應(yīng)的效果更加明顯；本實(shí)驗(yàn)提示：在失血性休克后限制性液體