氯霉素酶聯(lián)免疫分析方法及試劑盒研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩63頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文氯霉素酶聯(lián)免疫分析方法及試劑盒研究姓名:黃雅麗申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):農(nóng)藥學(xué)指導(dǎo)教師:朱國念李聰20050601氯霉素酶聯(lián)免疫分析方法及試劑盤研究ABSTRACTTwohaptens(CAPHSandCAPHS2)ofchloramphenicol(CAP)weresynthesizedbychemicalreactionbetweenCAPandsucciificanhydride,andidentifiedbyE

2、SIMSThen,twohaptenswerecovalentlyeoupledontobovineserumalbumin(BSAlwiththemodifiedactiveestermethod(cAPHSBSAandCAPHS2BSA)theratiosofconjunctionhaptensandBSAweredeterminedbyUVspectrometerTheanti—CAPHSlantibody(Ab0andanti—

3、CAP—HS2antibody(Ab2)wereobtainedbyimmanisingtheNewZealandwhiterabbitswithCAP—HSl—BSAandCAPHS2BSATitersofAblandAb2were839106and655104,respectiveIyIntermsoftheaffmityoftwoantibodiesbyELIS凡Ablwasbetter血anAb2Comparedwjthdiff

4、erentmethodsofcouplinghorseradishperoxidase(riPP)themodifiedmethodofsodiumperiodateWaSprovedtobemoreeffectivelytotagHRPonAbTheeffectsofvariousfactors,suchflSimmuneplate,coatingbuffercoatingtemperature,coatingtime,solvent

5、,ionicintensityandnon—specifieityadsorptionwerestudied,TheoptimumconditionforELISAwasgivenasfollowing:NUNcImmuneplatecoatedwitltthecoalingantlgen(1pg/mL100pLperwell)inO05Mcarbonatebicarbonatebuffer(pH96),madthenincubated

6、at37(2for2hoursSomeothermaterialssuchas2%defattedmilkpowder10%fetalcalfSgIllmO1%BSAand1%glufininO01MpH74phosphatebiphosphatebuffercouldimprovethesensitivityoftheELISAmethod,Adoptingtheoptimizedanal)tieconditionandHRPtagg

7、edAbi,theaffinityandspecifityofAbwereevaluatedbydirectoompetedELISAmethodResultsindicatedthatAblhadhighaffinityandspecifitytoCAPnelinearregressionequationforthemethodwasY=l094Ln(x130394,r=0999Thelimitofdetection(IC20)was

8、0386ng/mLThepercentagesofcrossreactionswiththiamphenicolandflorfenioolwcR0025%and0166%respectivelyandthosefortheotherrelativeantibioticswerelessthan210。,accordingwiththeliteratureTheELISAkitWaSpreparatedtodetecttheG心indi

9、伍erentmatrices,suchasshrimp,porkchickenandeggRecoveryofmethodstodetectCAPwererangedfrom716to1176%withcoefficientofvariationsoflessthanl39%atspikinglevelsof05,5,50ng/mL。ItwassuggestedthattheELISAKitcouldbeappliedtodemctth

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論