青霉素單克隆抗體的制備及其酶聯(lián)免疫試劑盒的初探.pdf_第1頁(yè)
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1、本研究制備了一株針對(duì)青霉素G的單抗，研究結(jié)果如下： 用人工抗原BP-BSA免疫BALB/c小鼠，經(jīng)三次免疫后，分離血清，建立間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法并測(cè)定血清效價(jià)。結(jié)果表明：包被抗原(BP-OVA)最適濃度為1μg/ml，血清效價(jià)為1:8000，抗體最適濃度為3.6ng/ml。 BALB/e小鼠經(jīng)BP-BSA第四次免疫5天后，取脾細(xì)胞與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞按照10:1的比例進(jìn)行細(xì)胞融合，選擇PEG2000作為融合劑。接種在

2、96孔板上，融合率為98％(195/199)。經(jīng)過(guò)4次亞克隆，得到1株能穩(wěn)定分泌BP單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株，命名為OF1。運(yùn)用體內(nèi)誘生法制備單抗，收集腹水并進(jìn)行單抗特性的鑒定。經(jīng)過(guò)ELISA檢測(cè)、染色體技術(shù)和SDS-PAGE電泳，表明OF1單抗的亞型為IgG<,1>，輕鏈為κ型，染色體數(shù)為90～105條，分子量為167.3KD，腹水效價(jià)為1:8.1×10<'5>，親和常數(shù)為3.718×10<'7>L/mol。與其結(jié)構(gòu)相似的同系物幾乎無(wú)

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