優(yōu)化獲能和冷凍稀釋液及其對豬精子肌動蛋白表達(dá)影響的研究.pdf

1、本試驗的主要目的為優(yōu)化獲能和冷凍稀釋液及其對豬精子肌動蛋白表達(dá)影響的研究。采用玻璃化冷凍法，將0.1 mol/L海藻糖、蔗糖和乳糖分別添加到冷凍稀釋液中，篩選最適合豬精液的冷凍保護劑；將豬精子置于 mTBM和 TALP兩種獲能液中分別孵化2h、3h、4h、5h和6h，篩選最適合豬精子的獲能體系；用最適的凍融和獲能方法進行SDS-PAGE和Western免疫印跡分析。結(jié)果表明：
　　1、預(yù)處理時以500 r/min離心10 min，

2、0.1 mol/L海藻糖和蔗糖組與對照組和0.1 mol/L乳糖TCG組相比，能顯著改善凍融后豬精子質(zhì)量（P<0.05），其凍融后精子的活率為42.1％和40.6％，頂體完整率為51.5％和49.8％，低滲膨脹率為46.2％和43.0％，平均路徑速度為32.8μm/s和33.2μm/s，運動的線速度為60.8％和59.0％，平均側(cè)擺幅度為1.7μm和1.6μm，平均鞭打頻率為7.7 Hz和7.6 Hz；其體外受精力也明顯高于0.1 mo

3、l/L乳糖和對照組（P<0.05），其卵裂率分別為41.2％和38％。
　　2、鮮精在mTBM和TALP兩種獲能液中獲能時，隨著獲能時間的延長，豬精子頂體反應(yīng)率逐漸升高、質(zhì)膜完整性逐漸下降，獲能6h時的頂體反應(yīng)率明顯高于其他時間組（P<0.05），分別為52.5％和50.8％；質(zhì)膜完整性明顯低于其他時間組（P<0.05），分別為30.5％和31.4％；獲能4 h的超激活運動率明顯高于其他時間組（P<0.05），分別為56.6％和5