牛精液冷凍稀釋液新配方研究.pdf

1、本研究所用精液采自西門塔爾、夏洛萊、利木贊和安格斯各3頭種公牛，通過改變牛精液冷凍保存液組成成分，檢測了不同種公牛冷凍前后精子活力、頂體完整率及精子畸形率，從而了解不同個體和品種對精液冷凍效果的影響，并篩選出牛精液冷凍稀釋液新配方，以提高牛精液冷凍保存的效果，提高人工授精受胎率。試驗及主要結(jié)果如下：
　　 1、為了分析用大豆卵磷脂替代卵黃的精液冷凍保存效果，并篩選大豆卵磷脂最適濃度，分二個試驗。①在牛冷凍精液稀釋液國家標準推薦的

2、配方基礎上，添加1％、3％、5％、7％、9％的大豆卵磷脂替代卵黃。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：當卵磷脂濃度為3％時，精液解凍后精子活率（為42.11±3.62％）顯著高于對照組（凍后活力為38.33±2.45％，p<0.05）。卵磷脂濃度為5％時，解凍后活力為41.00±3.77％，仍高于對照組（p>0.05）。凍后各組精子頂體完整率和畸形率差異較?。╬>0.05）。②以Tris-檸檬酸緩沖液為稀釋液，添加1％、3％、5％、7％、9％的大豆卵磷脂替代卵黃

3、，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：當卵磷脂濃度為3％時，精液解凍后精子活力（39.56±3.40％）高于對照組（35.89±2.32％，p>0.05），而各組精子頂體完整率和畸形率沒有顯著差異（p>0.05）。
　　 因此，牛冷凍稀釋液中添加3％和5％的卵磷脂冷凍效果較好。
　　 2、為了比較甘油（G）、乙二醇（EG）和二甲基酰胺（DA）三種抗凍保護劑兩兩配合的冷凍保護效果，分別設置了1％、3％、5％三個濃度兩兩正交組合，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：5％G+3

4、％EG、5％G+3％DA、3％EG+3％DA幾個試驗組效果較好，凍后活力分別為40.33±2.52％、38.67±1.15％、39.00±1.00％，均高于各自的對照組（p>0.05）。其中5％G+3％EG解凍后活力最高，精子頂體完整率也較高，畸形精子較少。
　　 3、為了比較甘油（G）、乙二醇（EG）和二甲基酰胺（DA）三種抗凍保護劑聯(lián)合應用的冷凍保護效果，分別設置了1％、3％、5％三個濃度進行正交組合，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：1％G+3％

5、EG+3％DA組合冷凍效果最好（凍后活力達40.00±2.65％），高于對照組（p>0.05）。但解凍后項體完整率在各試驗組間，試驗組和對照組間差異均不顯著（p>0.05）。
　　 4、為了分析牛個體和品種對精子冷凍解凍的影響，分別取西門塔爾（XM）、利木贊（LM）和夏洛萊牛（XL）的精液進行冷凍，并檢測了精子冷凍前后活力、冷凍后頂體完整率和精子畸形率。結(jié)果：XM、LM和XL鮮精活力無明顯差異（p>0.05）。但是冷凍解凍后，X