哈密瓜細(xì)菌性果斑病菌群體感應(yīng)信號(hào)分子的檢測(cè)及其合成基因luxI的功能.pdf

1、哈密瓜細(xì)菌性果斑病菌(Acidovorax avenae subsp. citrulli)是西瓜、甜瓜、哈密瓜等葫蘆科植物上的一種重要的病原細(xì)菌。近年來果斑病的發(fā)生趨勢(shì)有所上升，對(duì)我國哈密瓜及其他瓜類生長(zhǎng)造成嚴(yán)重威脅，常造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)危害。目前，對(duì)果斑病菌的研究主要集中于傳播機(jī)理，防治措施等方面，對(duì)于其致病機(jī)理的研究少有報(bào)道。 本研究利用AHL超敏感生物檢測(cè)菌株JZAl(pJZ372)(pJZ384)(pJZ410)對(duì)哈密瓜細(xì)菌

2、性果斑病菌(A.avenae subsp. citrulli)產(chǎn)生群體感應(yīng)信號(hào)分子的能力進(jìn)行了檢測(cè)，定量的β-半乳糖苷酶活性檢測(cè)與定性的反向薄層層析檢測(cè)表明該菌株可以產(chǎn)生一定活性的、1種類型(C8-AHL)的群體感應(yīng)信號(hào)分子，說明哈密瓜果斑病菌中存在QS系統(tǒng)。同時(shí)，在我們檢測(cè)的57株哈密瓜果斑病菌菌株中，39株菌株能產(chǎn)生群體感應(yīng)信號(hào)分子，18株未檢測(cè)到AHL類信號(hào)分子，說明QS系統(tǒng)在哈密瓜果斑病菌中存在差異。 利用分子生物信息學(xué)

3、，通過同源性比對(duì)，在哈密瓜果斑病菌的全基因中發(fā)現(xiàn)了信號(hào)分子的合成基因acluxl.通過PCR技術(shù)，從AHL產(chǎn)生菌株xjL12中擴(kuò)增了acluxl基因。將克隆的acluxl基因在autoinducer-1(AI-1)AI-1缺陷的菌株Escherichia coliDH5α中原核表達(dá)，發(fā)現(xiàn)DH5a可恢復(fù)產(chǎn)生AI-1的能力.利用同源重組技術(shù)，構(gòu)建了acluxl基因的缺失突變株，信號(hào)分子檢測(cè)和致病性測(cè)定試驗(yàn)表明，acluxl缺失突變株完全喪失