水稻細(xì)菌性谷枯病菌的分子檢測(cè)及細(xì)菌性褐條病病原鑒定研究.pdf

1、水稻細(xì)菌性谷枯病菌Burkholderia glumae不但引起谷粒枯而且也引起秧苗腐爛，已對(duì)發(fā)生國家的水稻生產(chǎn)構(gòu)成嚴(yán)重威脅。鑒于其檢疫重要性，2007年被列為我國進(jìn)境檢疫性有害生物，然而，國內(nèi)尚未建立該菌的檢測(cè)方法．本研究采用實(shí)時(shí)熒光PCR(Real-time fluorescence PCR)和經(jīng)典PCR技術(shù)進(jìn)行水稻細(xì)菌性谷枯病菌檢測(cè)，擬建立準(zhǔn)確、快速、靈敏的方法，以有效控制該病在我國的擴(kuò)散和蔓延．研究結(jié)果表明，供試所有谷枯病菌都能

2、產(chǎn)生139bp左右的特異性片段，非谷枯菌株均無特異性片段產(chǎn)生．兩種檢測(cè)方法的靈敏度比較發(fā)現(xiàn)，常規(guī)PCR技術(shù)能檢測(cè)到104CFU/ml左右的菌懸液，實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)能檢測(cè)到102CFU/ml左右的茵懸液，實(shí)時(shí)熒光PCR比常規(guī)PCR靈敏度提高100倍。將模擬帶菌種子與滅菌種子按1：100混合，可以檢測(cè)到該菌的存在。 水稻細(xì)菌性褐條病可由Acidovorax avenae subspecies avenae和Pseudomonas

3、syringae pv.panici兩種完全不同的病原引起，主要造成秧苗腐爛，是水稻苗期的主要病害之一。為明確從褐條病稻苗上分離出來的細(xì)菌屬于哪一種病原，以便開展有效的病害治理。分離獲得6株褐條病致病細(xì)菌，其中4株經(jīng)主要細(xì)菌學(xué)特性、菌落形態(tài)、致病性、Biolog、脂肪酸分析(FAME)、電鏡觀察、Nested-PCR鑒定及與3株水稻細(xì)菌性褐條病標(biāo)準(zhǔn)菌株及2株西瓜果斑病標(biāo)準(zhǔn)菌株的比較，證實(shí)了該病是由單極鞭革蘭氏陰性細(xì)菌Acidovorax