巨噬細胞移動抑制因子和結(jié)締組織生長因子在食管癌中的表達及其與預(yù)后的關(guān)系.pdf

1、背景與目的:
　　 食管癌是人類常見的消化道惡性腫瘤,發(fā)病率在世界范圍內(nèi)居第6位,在我國有著更高的發(fā)病率。我省是食管癌的高發(fā)區(qū),尤其是林州等地區(qū)有著更高的發(fā)病率。食管癌的發(fā)生和發(fā)展涉及多種抑癌基因和原癌基因的改變,現(xiàn)在還不能在分子水平上對食管癌做出充分的解釋。食管癌早期癥狀隱匿,大多數(shù)患者就診時已處于晚期,即使手術(shù)切除,預(yù)后仍很差。目前已經(jīng)開展很多關(guān)于食管癌形態(tài)學(xué)和臨床病理特征的相關(guān)研究,但是到目前為止仍然沒有找到一種具有臨床實

2、用價值的預(yù)測因子。如能很好的判斷預(yù)后,對篩選高危病人及幫助制定個體化治療方案大有裨益。
　　 近年來腫瘤微環(huán)境中間質(zhì)細胞、細胞因子等對腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移等有重要作用,有報道食管癌的發(fā)生發(fā)展與炎癥微環(huán)境關(guān)系密切。巨噬細胞移動抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)主要來源于活化T淋巴細胞,可以抑制腫瘤微環(huán)境中巨噬細胞的游走。MIF功能復(fù)雜,不僅可以調(diào)節(jié)機體免疫、參與炎癥反

3、應(yīng),而且在多種組織器官纖維化過程中發(fā)揮重要作用。有研究報道MIF在多種腫瘤細胞中高表達,如肺癌、肝癌、食管癌、結(jié)直腸癌、頭頸部鱗癌等。結(jié)締組織生長因子(connective tissue growth factor,,CTGF)屬于生長因子CCN基因家族,該家族還包括Cyr61(cysteine-rich61)、腎母細胞瘤過度表達基因(nephroblastoma over-expressed gene,Nov／CCN3)、Wisp-1

4、／elml(CCN4)、Wisp-2／rCov1(CCN5)、Wisp-3(CCN6)。CTGF通過誘導(dǎo)腫瘤微環(huán)境中重要的間質(zhì)細胞——成纖維細胞增殖,并分泌細胞外基質(zhì),參與多種細胞的生物學(xué)功能,如細胞增殖、黏附、血管生成和器官纖維化,而且和多種惡性腫瘤的發(fā)生、進展、轉(zhuǎn)移及其預(yù)后有密切關(guān)系。本研究采用免疫組織化學(xué)染色法分別檢測MIF和CTGF在84例食管癌組織中的表達情況,分析這二者的表達水平與食管癌臨床病理特征之間的關(guān)系及其對患者預(yù)后影

5、響,并探討可能的調(diào)節(jié)途徑及作用機制。目的在于能夠為食管癌的預(yù)后評估及基因治療提供理論依據(jù)。
　　 方法:
　　 1.收集2004年1月1日-2006年6月30日于鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院和河南省腫瘤醫(yī)院胸外科接受手術(shù)切除的84例食管癌標(biāo)本,所有標(biāo)本均經(jīng)病理確診。所有病例無糖尿病、類風(fēng)濕、甲狀腺功能亢進等其他疾病,術(shù)前未接受化放療或針對腫瘤治療的靶向治療。臨床病歷資料完整,電話隨訪所有患者,截止日期為2010年6月30日；生存

6、時間以月為單位,計算自手術(shù)之日至死亡或最后隨訪時間；
　　 2.應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色法檢測MIF和CTGF在84例食管癌組織中的表達水平,并分析這兩個指標(biāo)與食管癌臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系及其表達水平對預(yù)后的影響,探討其在食管癌中的作用；
　　 3.采用SPSS10.0統(tǒng)計軟件包對所有實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料比較采用x2檢驗,采用Kaplan-Meier法計算生存率及描繪生存曲線,Cox比例風(fēng)險模型進行多因素生存分析,

7、Spearman等級相關(guān)進行MIF和CTGF表達的相關(guān)性分析,以a=0.05作為檢驗水準(zhǔn)。
　　 結(jié)果:
　　 1.MIF在食管癌組織中廣泛表達,陽性著色呈灶狀或彌漫性分布,主要位于腫瘤細胞細胞質(zhì),呈棕黃色顆粒,也有少數(shù)表達于細胞核。MIF的表達與食管癌患者的年齡、性別、組織學(xué)類型、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、腫瘤分化程度在統(tǒng)計學(xué)上無明顯差異(P>0.05),但是與患者的腫瘤浸潤深度(P=0.006)和臨床分期密切相關(guān)(P=0.

8、023)；
　　 2.CTGF陽性蛋白主要定位于腫瘤細胞細胞質(zhì)或胞膜,棕黃色或棕褐色顆粒,還可見于癌組織周圍的間質(zhì)纖維結(jié)締組織和平滑肌。CTGF的表達與患者的年齡、性別、組織學(xué)類型、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、腫瘤分化程度在統(tǒng)計學(xué)上無明顯差異(P>0.05),但與患者的腫瘤浸潤深度(P=0.011)和臨床分期密切相關(guān)(P=0.006);
　　 3.在84例食管癌組織中MIF表達分陰性、陽性和強陽性3組,生存曲線分析顯示,強陽性表

9、達組與患者預(yù)后顯著負相關(guān),陰性和陽性表達組術(shù)后累計生存率顯著高于強陽性表達組(P=0.021)；
　　 4.CTGF分高表達和低表達兩組,高表達組與低表達組相比,高表達組患者生存低于低表達組,即CTGF高表達組與患者預(yù)后顯著負相關(guān)(P=0.001)；
　　 5.以患者的年齡、性別、腫瘤浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期、腫瘤分化程度、癌組織中CTGF和MIF表達水平為變量,進行Cox多因素回歸分析,結(jié)果顯示,食管癌的獨立預(yù)

10、后因素為TNM分期(P=0.002)、腫瘤分化程度(P=0.000)及CTGF表達水平(P=0.023)(見表3)；
　　 6.食管癌組織中MIF和CTGF蛋白表達的相關(guān)性分析,在84例食管癌組織標(biāo)本中,MIF和CTGF同時低表達為30例,同時高表達為21例,通過2×2配對資料的關(guān)聯(lián)性分析,顯示二者在食管癌組織中的表達呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.238,P=0.024)。
　　 結(jié)論:
　　 1.MIF和CTGF在食管

11、癌中的表達與腫瘤的浸潤深度和臨床分期密切相關(guān),提示其高表達促進了食管癌的發(fā)展和浸潤,炎癥反應(yīng)和纖維化與食管癌的浸潤和轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系；
　　 2.MIF和CTGF高表達患者預(yù)后較差,低表達組預(yù)后較好,提示二者在食管癌的轉(zhuǎn)歸過程中有重要作用,臨床上可以提示食管癌患者的預(yù)后情況；
　　 3.MIF和CTGF在食管癌組織中的表達呈正相關(guān)關(guān)系,說明二者在食管癌中的高表達可能具有協(xié)同作用,共同參與了食管癌的發(fā)展、浸潤及轉(zhuǎn)移過程。