不同保存液對兔靜脈移植物保護作用的實驗研究.pdf

1、前言：
　　 冠狀動脈旁路移植術(CoronaryArteryBypassGraft,CABG)是臨床上治療冠心病的重要途徑之一。而血管移植后的遠期通暢率仍不盡如人意,據(jù)統(tǒng)計,靜脈橋的十年通暢率僅60%[1],仍有大部分患者需后續(xù)治療。移植損傷、血管擴張,管壁缺血、血流動力學改變(動脈壓、剪切力)等因素引起多種細胞因子和生長因子分泌,促使血管平滑肌細胞增生并向內(nèi)膜遷移,進而引起細胞外基質(zhì)沉積、斑塊形成[2],被認為是遠期血管狹窄

2、的主要機制。有研究表明,靜脈手術后粘附分子表達增加致使單核細胞早期發(fā)生粘附,浸潤內(nèi)膜,移行為巨噬細胞,最終轉(zhuǎn)化為泡沫細胞,成為粥樣硬化的核心,這就是最終導致靜脈橋狹窄的過程[1,2]。因此,針對移植血管保護的許多新技術,如藥物應用、血管外支架、保存液、電磁輻射、基因工程等也逐漸進入臨床,在搭橋過程中的血管保護也逐漸為臨床醫(yī)師所重視。搭橋手術中,往往需要搭2-3根橋,而公認通暢率較高的動脈橋,因其數(shù)量及長短范圍等因素限制了其臨床應用,大隱

3、靜脈以其易獲得、足夠長度、損傷小等優(yōu)點成為較多臨床醫(yī)院的首選。在CABG中,取下靜脈至搭到最后一根靜脈,往往需要30分鐘以上的時間,在這段時間內(nèi),靜脈血管的保護不足,使得血管內(nèi)皮細胞受到破壞,進而導致血栓形成及內(nèi)皮細胞增生。而傳統(tǒng)的罌粟堿保存液雖具有良好的擴血管功能,但其PH值、滲透壓及血管內(nèi)皮細胞的保護都不甚理想,所以,很多新型的保存液發(fā)展出來。
　　 全血保存液可以良好的保護血管內(nèi)皮細胞,維拉帕米-硝酸甘油保存液可以良好的擴

4、張血管及抑制Ca2+通道,從而保護內(nèi)皮細胞,本實驗探討罌粟堿保存液、硝酸甘油.維拉帕米保存液、肝素化全血保存液及林格生理鹽水對照液對兔靜脈移植血管的保護作用效果,從而為臨床的應用及進一步研究提供依據(jù)。
　　 材料與方法：
　　 健康新西蘭大耳兔48只,分四組,每組12只,分別為:A組:維拉帕米+硝酸甘油保存液組(Nitroglycerin-Verapamilsolucoin,GV組)、B組:肝素化全血保存液組(Hcpar

5、inizedbloodsolution,PB組)、C組罌粟堿保存液組(Papaverinesolution,PAP組)及D組對照組(林格液+肝素)。取兔頸外靜脈,分別放置與不同保存液中30分鐘后,移植至頸內(nèi)動脈。于移植后第7天、14天、28天取出移植物,HE染色觀察不同時期內(nèi)皮增厚及中膜增生情況。另取5只兔雙側(cè)頸外靜脈,共10支,長約2cm,粗細均勻,分為40段,每段約0.5鋤,分別放入1ml不同保存液中,30分鐘后取出靜脈,ELISA

6、法測量1ml保存液中內(nèi)皮素(ET-1)含量,HE染色觀察短時間保存后內(nèi)皮細胞破壞情況。
　　 結果：
　　 第7天各靜脈移植物比較,各組間內(nèi)膜中膜比值(Intima-mediavalue,I/M值)無差異;第14天及第28天的各組比較,A組及B組內(nèi)膜增厚最輕,C組及D組內(nèi)膜增生最為嚴重,測得I/M值進行比較,其中:A組與B組比較,其I/M值無差異,A組與C組及D組均有差異(P＜0.05);B組與C組及D組比較均有差異(P

7、＜0.05);C組與D組比較無差異。ELISA法測定內(nèi)皮素-1(Endothelin-1,ET-1)釋放量,A組ET-1釋放量較B組、C組、D組均明顯降低,其差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01),B組ET-1釋放量較高,與C組及D組比較均有差異(P＜0.05),C組與D組無差異;短時間保存后,四組內(nèi)皮脫落情況觀察,A組及B組短期保存后的血管內(nèi)皮破壞情況較C組、D組要輕,內(nèi)皮細胞覆蓋率較高,A組與B組內(nèi)皮細胞覆蓋率比較無差異,A組與C組及D組

8、比較均有差異(P＜0.01),B組與C組及D組比較均有差異(P＜0.01),C組與D組比較無差異。
　　 結論：
　　 1、肝素化全血保存液及GV液對兔靜脈血管的保護作用優(yōu)于罌粟堿組及對照組,其內(nèi)膜增厚情況小于罌粟堿組及對照組,內(nèi)皮細胞覆蓋率優(yōu)于罌粟堿組及對照組;
　　 2、肝素化全血保存液的ET-1在四組中最高;GV組ET-1釋放量在四組中最低;
　　 3、GV保存液在四組保存液中對血管的保護作用最理想