前列地爾對靜脈移植物保護(hù)作用的對比研究.pdf

1、目的:隨著社會的發(fā)展,缺血性心臟病的患病率和死亡率也在逐年提高,目前成為一些地區(qū)居民死亡的首位原因,其中冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(atherosclerotic heart disease AHD)占很大的部分。冠狀動脈旁路移植術(shù)自1969年Favalora將自體大隱靜脈(great saphenousvein,GSV)作為血管橋第一次應(yīng)用于臨床獲得成功以后,以GSV為材料的冠狀動脈移植術(shù)已經(jīng)成為了臨床上治療冠狀動脈粥樣硬化性心臟病AH

2、D的有效手段之一。由于自身的組織學(xué)和生理學(xué)的特點,GSV存在明顯的近遠(yuǎn)期病變率,從而導(dǎo)致移植手術(shù)的失敗或影響術(shù)后的長期效果。乳內(nèi)動脈、橈動脈等動脈性管道已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于臨床且比GSV有更高的近遠(yuǎn)期通暢率,10年通暢率可達(dá)90％以上,但是由于動脈移植手術(shù)自身特點,如手術(shù)難度較大、操作繁瑣、耗時較長、取材部位較少等缺點,現(xiàn)臨床上最廣泛應(yīng)用的血管橋的材料還是大隱靜脈。
　　 如何提高GSV橋遠(yuǎn)期的通暢率已經(jīng)成為了心血管外科研究的熱點。

3、影響GSV通暢率的因素有很多,其中包括:血管本身條件,外科離取技術(shù),血管內(nèi)皮細(xì)胞(VEC)的保護(hù)完整程度,移植后GSV的動脈化反應(yīng),抗凝藥物應(yīng)用,危險因素控制等等。
　　 血管內(nèi)膜形態(tài)結(jié)構(gòu)的完整性及其功能的完整性對遠(yuǎn)期通暢效果起著十分重要的作用。目前臨床圍手術(shù)期采用的治療和預(yù)防狹窄發(fā)生的方法有很多,如藥物治療、光動力學(xué)療法、基因治療和放射線照射療法等等,但都沒有明確可靠地效果。
　　 研究表明血管內(nèi)皮損傷從開始離取、擴(kuò)張

4、和保存血管時就已經(jīng)開始。所以no-touch外科離取技術(shù),離取后血管橋的保護(hù)和手術(shù)過程中嫻熟輕柔的操作是狹窄預(yù)防的關(guān)鍵。
　　 臨床上在冠狀動脈旁路移植術(shù)(coronary artery bypass graft CABG)中GSV離取后到手術(shù)吻合之前常用不同的保護(hù)液充盈、沖洗管腔和浸泡保存。理想的保護(hù)液能快速明顯的擴(kuò)張GSV,抑制GSV的痙攣,減少血管內(nèi)膜損害,保護(hù)GSV內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能的完整性,從而起到預(yù)防狹窄的作用。

5、臨床最常用的肝素和(或)罌粟堿鹽水保護(hù)液,能夠一定程度上緩解GSV的痙攣,但缺乏對內(nèi)皮細(xì)胞的有效保護(hù)作用。
　　 本實驗旨在研究前列地爾(PGE1)對兔頸外靜脈血管橋的保護(hù)作用,從而為臨床冠狀動脈旁路移植術(shù)中靜脈保護(hù)液的選取提供有力的實驗證據(jù)。
　　 方法:實驗于2009年3月至2009年12月于河北醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院心外科實驗室完成。
　　 本實驗采用同側(cè)頸外靜脈-頸總動脈實驗動物模型。選用30只健康普通家兔

6、(由河北醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供),隨機(jī)分為三組:A、B、C三組,術(shù)中以三種不同保護(hù)液(肝素保護(hù)液、罌粟堿保護(hù)液、前列地爾保護(hù)液)對靜脈橋構(gòu)建過程中血管橋的保存進(jìn)行干預(yù),獲取的頸外靜脈以三種不同保護(hù)液50mmHg壓力沖洗管腔2次,檢查有無漏血后存放于不同的保護(hù)液中60分鐘。
　　 取部分頸外靜脈作為血管橋行端側(cè)吻合于同側(cè)頸總動脈之上,部分靜脈制作成相應(yīng)的標(biāo)本進(jìn)行電鏡下超微結(jié)構(gòu)的對比觀察;術(shù)后2周對在體靜脈橋近吻合口處和中央部進(jìn)行

7、活體取材。
　　 對浸泡1小時的標(biāo)本采用透射電鏡對比觀察內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu),以判斷不同處理因素之間保護(hù)效果的差異;對術(shù)后2周的標(biāo)本,采用計算機(jī)圖像分析系統(tǒng)在顯微鏡下進(jìn)行分析,對管腔增生程度進(jìn)行形態(tài)學(xué)對比,測量不同處理組管腔內(nèi)膜層增生程度的差異,測定血管壁內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞SP免疫組化染色的陽性率,并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,初步探討PGE1對GSV內(nèi)膜增生所引起的術(shù)后狹窄的預(yù)防效果。
　　 結(jié)果:肝素組-A組罌粟堿組-B組前列地爾

8、組-C組
　　 對實驗動物近吻合口處和中央部靜脈橋進(jìn)行分別取材
　　 1移植靜脈的吻合口處標(biāo)本組織病理學(xué)變化HE染色
　　 1.1各處理組之間近吻合口處相比管腔內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞增生程度(內(nèi)膜和中膜增生厚度)均不存在差異,P＞0.05,統(tǒng)計學(xué)無明顯意義。
　　 1.2各處理組之間近吻合口處SP染色結(jié)果顯示,各組之間內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞增生程度均不存在差異(P＞0.05)。
　　 2移植靜脈的中央

9、部標(biāo)本組織病理學(xué)變化HE染色
　　 2.1管腔增生程度(術(shù)后兩周管腔內(nèi)膜+中膜厚度(D1)與術(shù)前內(nèi)膜+中膜厚0度(D2)之比,(D1/D2％)
　　 A組(480.126±27.460)、B組(478.881±46.608)、C組(282.115±44.757)
　　 A組和B組相比P＞0.05,無明顯差異;C組與A或B組相比P＜0.05,C組與A、B組之間均有明顯差別,有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 2.2 SP

10、免疫組化染色結(jié)果顯示:每高倍鏡400x視野下單位面積中,增生細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)(N0/N％)
　　 A肝素組(53.340±5.681)、B罌粟堿組(53.198±5.837)、C前列地爾組(31.516±2.543)
　　 A組和B組相比P＞0.05,無明顯差異;C組與A或B組相比P＜0.05,統(tǒng)計學(xué)有明顯意義。
　　 2.3透射電鏡觀察
　　 2.3.1肝素組:內(nèi)膜層不連續(xù),甚至中斷、殘缺,細(xì)胞連接破壞

11、,內(nèi)皮細(xì)胞水腫,與基底連接不緊密,可見線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器水腫,部分胞膜不完整,胞漿、細(xì)胞器流失,細(xì)胞變的疏松,內(nèi)膜層附著血小板,纖維素等物質(zhì),并有部分可見中膜平滑肌暴露。
　　 2.3.2罌粟堿組:內(nèi)膜連續(xù)尚可,有局部內(nèi)膜薄弱疏松,細(xì)胞結(jié)構(gòu)尚完整,線粒體及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器水腫程度較肝素組輕。
　　 2.3.3前列地爾組:內(nèi)膜上偶見附著的血小板和纖維素等,細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整,胞核核膜完整,胞核染色質(zhì)稀疏均勻,胞漿均勻,線粒體

12、及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器水腫程度較輕,細(xì)胞器狀態(tài)穩(wěn)定,內(nèi)膜層連接緊密未見中膜暴露,基底部連接緊密,內(nèi)膜層保護(hù)較完整。
　　 結(jié)論:本實驗結(jié)果表明
　　 1兔頸外靜脈-頸總動脈移植模型中,術(shù)后吻合口處的再狹窄與選用何種保護(hù)液關(guān)系不大,可能與吻合技術(shù)、縫線和血流動力學(xué)的變化有關(guān)。
　　 2前列地爾保護(hù)液組兔頸外靜脈橋再狹窄的程度要明顯小于臨床中常用的肝素和罌粟堿,延緩了靜脈橋再狹窄的進(jìn)程,提高了移植靜脈通暢率。