不同缺血后處理方案對(duì)兔擠壓綜合征損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景：
　　近年來(lái)，我國(guó)地震災(zāi)害頻發(fā)，其中擠壓綜合征(Crush Syndrome， CS)是地震災(zāi)后傷亡原因中僅次于直接創(chuàng)傷致死的第二死因。缺血后處理(Ischemic Post-conditioning，IPost)作為缺血再灌注損傷后的一項(xiàng)新型治療手段，是否對(duì)擠壓綜合征所導(dǎo)致的損傷同樣具有保護(hù)作用？本課題將通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)來(lái)觀察不同時(shí)間缺血后處理方案對(duì)家兔擠壓綜合征損傷的保護(hù)效應(yīng)。
　　目的：
　　一、建立具有可重復(fù)

2、性的家兔CS模型。
　　二、篩選缺血后處理對(duì)家兔CS損傷保護(hù)效應(yīng)的最佳時(shí)間窗。
　　三、驗(yàn)證無(wú)創(chuàng)缺血后處理對(duì)家兔CS損傷的保護(hù)效應(yīng)。
　　方法：
　　選取56只健康成年日本大耳白兔，體重2.3±0.2Kg，隨機(jī)分為七組(n=8)，使用自動(dòng)氣壓止血帶對(duì)家兔單下肢進(jìn)行擠壓(100Kpa，8h)建立CS模型，如下：
　　S組（Sham組，）為假手術(shù)對(duì)照組，擠壓造模8小時(shí)后，游離雙下肢腹股溝處股動(dòng)、靜脈，1小時(shí)后縫

3、合雙下肢切口。
　　后處理A組（IPA組，5×5s/5s），擠壓造模8小時(shí)后，游離雙下肢腹股溝處股動(dòng)、靜脈，解壓后立即給予動(dòng)脈夾夾閉動(dòng)、靜脈5秒，再灌注5秒，循環(huán)5次，1小時(shí)后縫合雙下肢切口。
　　后處理B組（IPB組，5×30s/30s），擠壓造模8小時(shí)后，游離雙下肢腹股溝處股動(dòng)、靜脈，解壓后立即給予動(dòng)脈夾夾閉動(dòng)、靜脈30秒，再灌注30秒，循環(huán)5次，1小時(shí)后縫合雙下肢切口。
　　后處理C組（IPC組，5×1min/1

4、min），擠壓造模8小時(shí)后，游離雙下肢腹股溝處股動(dòng)、靜脈，解壓后立即給予動(dòng)脈夾夾閉動(dòng)、靜脈1分鐘，再灌注1分鐘，循環(huán)5次，1小時(shí)后縫合雙下肢切口。
　　后處理D組（IPD組，5×5min/5min），擠壓造模8小時(shí)后，游離雙下肢腹股溝處股動(dòng)、靜脈，解壓后立即給予動(dòng)脈夾夾閉動(dòng)、靜脈5分鐘，再灌注5分鐘，循環(huán)5次，1小時(shí)后縫合雙下肢切口。
　　后處理E組（IPE組，5×10min/10min），擠壓造模8小時(shí)后，游離雙下肢腹股溝

5、處股動(dòng)、靜脈，解壓后立即給予動(dòng)脈夾夾閉動(dòng)、靜脈10分鐘，再灌注10分鐘，循環(huán)3次，1小時(shí)后縫合雙下肢切口。
　　無(wú)創(chuàng)后處理F組（IPF組，5×1min/1min），擠壓造模8小時(shí)后，解壓后立即使用旋壓式止血帶捆綁雙下肢1分鐘，再灌注1分鐘，循環(huán)5次。
　　實(shí)驗(yàn)中分別通過耳中動(dòng)脈置管，連接多道生理信號(hào)采集系統(tǒng)，分別在擠壓前、解壓時(shí)及解壓后2h、6h、12h、18h、24h七個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行測(cè)量動(dòng)脈壓、心率和尿量，取耳中動(dòng)脈血用全自

6、動(dòng)血液生化分析儀檢測(cè)K+、Scr、BUN、CK的變化，用ELISA法檢測(cè)血清中NGAL、Mb和IL-6的變化，取腎臟及擠壓處肌肉組織進(jìn)行病理觀察。同時(shí)觀察家兔在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中的生命體征變化及局部癥狀變化。
　　結(jié)果：
　　解除壓迫后各組均出現(xiàn)精神萎靡，呼吸急促，心率減慢，體溫下降。在解壓后24小時(shí)內(nèi)有17只家兔出現(xiàn)死亡（S組3只，IPA～I(xiàn)PD組各2只，IPE和IPF組各3只），均出現(xiàn)在解壓后18～24小時(shí)之間。在解壓2h后各組

7、均出現(xiàn)尿量減少，顏色加深，甚至出現(xiàn)肌紅蛋白尿，解壓18h后均為無(wú)尿情況，各組尿量之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　解壓后各組MAP逐步上升，解壓后2小時(shí)達(dá)到峰值，解壓2小時(shí)以后逐步下降。各缺血后處理實(shí)驗(yàn)組的血液指標(biāo)均比對(duì)照S組低，其中在部分血液指標(biāo)(CK、Scr、K+、MB、BUN、IL-6及NGAL)中，IPC和IPD組(1～5min)的在解壓2h后降低的更為顯著，與其他各組相比均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中IPC組降低的最為顯著。
　　使

8、用旋壓止血帶給予雙下肢(5×1min/1min)再灌注的無(wú)創(chuàng)缺血后處理（IPF組），進(jìn)一步驗(yàn)證其保護(hù)效應(yīng)，IPF組與IPC組在各項(xiàng)血液指標(biāo)的統(tǒng)計(jì)結(jié)果表示，二者均無(wú)差異顯著性，表明無(wú)創(chuàng)缺血后處理同樣可以具有保護(hù)作用。
　　結(jié)論：
　　一、利用自動(dòng)氣壓止血帶給予家兔單下肢100Kpa擠壓8h可以穩(wěn)定建立擠壓綜合征的模型。
　　二、給予擠壓綜合征家兔雙下肢5個(gè)循環(huán)1～5min的遠(yuǎn)隔缺血后處理可以對(duì)機(jī)體損傷產(chǎn)生有效的保護(hù)作用并