苦茶化學(xué)成分分析及其神經(jīng)藥理活性初步研究.pdf

1、苦茶Camellia assamica var．kucha是山茶屬茶組茶系下普洱茶的一個變種，其化學(xué)成分上的特殊性在于富含1，3，7,9-四甲基尿酸。本論文在前人研究的基礎(chǔ)上，首先采用HPLC-DAD-MS/MS技術(shù)對苦茶芽葉中的化學(xué)成分進行了定性分析，并對苦茶芽葉中的主要化學(xué)成分隨季節(jié)的變化規(guī)律，以及在苦茶植株不同部位中各化學(xué)成分的分布情況進行了更深入的研究，最后對苦茶的安全性及其對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的藥理作用進行了初步探討。本論文研究成果

2、將為苦茶這一我國特有茶樹資源的進一步開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。具體研究工作包括以下6個方面： 1.苦茶芽葉中嘌呤生物堿和茶多酚的HPLC-DAD-MS/MS分析 采用HPLC-DAD-MS/MS技術(shù)對苦茶芽葉中的化學(xué)成分進行分析，通過與對照品的保留時間、紫外吸收以及質(zhì)譜數(shù)據(jù)進行比較，并參考相關(guān)文獻，鑒定或推測出14種化合物，包括3種嘌呤生物堿(可可堿、1，3,7,9-四甲基尿酸、咖啡堿)，7種常見的兒茶素類化合物(GC、EG

3、C、C、EC、EGCG、GCG、ECG)，以及4種非兒茶素類多酚化合物(5-沒食子?？鼘幩狨?、楊梅素己糖苷、槲皮素己糖苷和小木麻黃素)。 2.苦茶芽葉中嘌呤生物堿和兒茶素類成分的含量隨季節(jié)變化的規(guī)律 采用HPLC法對苦茶芽葉中的嘌呤生物堿和兒茶素類成分在4～11月間的含量變化進行了研究，其結(jié)果為：嘌呤生物堿含量最高的是四甲基尿酸，占茶葉干重的1.8～3.7％；其次是咖啡堿，含量為0.07～1.63％；最后是可可堿，含量為

4、0.011～0.073％。四甲基尿酸的含量在4月最高，可可堿和咖啡堿的含量則在6月最高，三者的含量變化在8～11月均比較平緩，最大的差異是在春末的4月，四甲基尿酸的含量達到最高值，可可堿和咖啡堿的含量卻為最低值。兒茶素類成分在夏季的含量比春、秋兩季高，與傳統(tǒng)茶中兒茶素類成分的季節(jié)變化規(guī)律一致。 3.苦茶植株不同部位中嘌呤生物堿和兒茶素類成分的含量分布 嘌呤生物堿和兒茶素類成分在野生苦茶的花、莖、果皮和種子中的含量組成差異

5、很大，但在4個部位中均檢測到了四甲基尿酸，其中果皮中的四甲基尿酸含量最高，可達1.73％。此外，除了少量兒茶素類成分外，果皮中檢測不到或僅檢測到極少量的咖啡堿和可可堿。因此，苦茶果皮可以作為提取四甲基尿酸的理想原料。 4.苦茶果皮中四甲基尿酸的提取純化工藝研究 以野生苦茶的果皮為原料，用正交試驗法對四甲基尿酸的提取工藝進行了優(yōu)化，所得提取液再經(jīng)氯仿萃取和70％乙醇重結(jié)晶純化，可得到純度>99％的微黃色針狀結(jié)晶，得率為1.

6、35％：‘經(jīng)熔點測定和1H-NMR、13C-NMR．EI-MS、UV分析，證明該結(jié)晶確為1，3，7,9.四甲基尿酸。 5.苦茶的急性毒性研究 對苦茶葉水提液進行急性毒性試驗研究，在最大灌胃給藥劑量21.50g/kg．bw下，動物在觀察期內(nèi)未出現(xiàn)任何中毒癥狀及死亡，故苦茶急性毒性經(jīng)口L,Dso>21.50 g/kg．bw，按毒性分級標準判定屬無毒級。 6.苦茶對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的藥理作用研究 采用翻正反射法利用