304-Cu抗菌不銹鋼材料的細胞毒性評價.pdf

1、矯治裝置是正畸臨床治療中最常用的功能部件,包括:托槽、帶壞、弓絲、矯治附件和正畸支抗種植體等。矯治裝置材料的性能可以影響矯治力的施加效果,對提高矯治質量和縮短矯治療程起到重要的作用。目前臨床上應用的多數(shù)矯治裝置是由醫(yī)用不銹鋼材料制成,它具有優(yōu)良的力學性能,耐腐蝕性和良好的可加工性。但醫(yī)用不銹鋼本身不具有抗菌作用,當這些矯正裝置應用于口腔環(huán)境后,降低了口腔自潔作用,破壞了口腔正常菌群的生態(tài)平衡,菌斑易于堆積于矯治裝置周圍,不利于口腔衛(wèi)生的

2、保持,容易導致齲病,牙齦炎,牙周炎,支抗種植體周圍炎等細菌感染性疾病,不僅危害患者健康,更延長了矯治的過程。近年來,中國科學院金屬研究所研制出304-Cu抗菌不銹鋼,它具有普通不銹鋼的優(yōu)良性能,而且它的抗菌有效性已經(jīng)過諸多實驗研究被證實。本實驗旨在評價抗菌不銹鋼材料的細胞毒性,并與臨床常用的醫(yī)用不銹鋼材料以及純鈦材料進行比較,為其進一步的臨床應用提供生物學證據(jù)。
　　 方法：
　　 本實驗通過體外實驗的方法對材料進行研究

3、,選擇L-929細胞系作為實驗對象,將實驗材料分為普通不銹鋼、抗菌不銹鋼、純鈦三個實驗組,并設立空白對照組和陽性對照組。通過細胞形態(tài)學觀察、CCK-8實驗和流式細胞術實驗評價抗菌不銹鋼材料對細胞毒性的影響。在三種材料的浸提液與細胞作用24 h、48 h、72 h后,用倒置相差顯微鏡觀察L-929細胞的數(shù)量、形態(tài)以及生長情況;通過CCK-8實驗得出光密度值并計算得出細胞相對增值率,判斷細胞毒性級別;通過流式細胞儀Annexin V-FIT

4、C/PI雙染法觀察在不同合金浸提液中培養(yǎng)的小鼠成纖維細胞的散點圖,并計算各組細胞凋亡率,對抗菌不銹鋼材料做出細胞毒性評價。
　　 倒置相差顯微鏡觀察結果:培養(yǎng)24 h,普通不銹鋼組,抗菌不銹鋼組,純鈦組,空白對照組細胞貼壁生長狀態(tài)良好;陽性對照組細胞生長狀態(tài)異常。培養(yǎng)48h,普通不銹鋼組,抗菌不銹鋼組,純鈦組,空白對照組細胞生長旺盛,排列密集規(guī)則;陽性對照組細胞固縮。培養(yǎng)72 h,普通不銹鋼組,抗菌不銹鋼組,純鈦組,空白對照組細

5、胞布滿視野,未見異型性;陽性對照組均為死亡細胞和碎片。
　　 CCK-8實驗結果:隨著培養(yǎng)時間的延長,普通不銹鋼組,抗菌不銹鋼組,純鈦組,空白對照組的光密度值均相應的增加。各時點普通不銹鋼組,抗菌不銹鋼組的光密度值均低于純鈦組和空白對照組(P＜0.05),但普通不銹鋼組,抗菌不銹鋼組間比較無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)?？瞻讓φ战M各時間點細胞毒性均為0級,純鈦組,普通不銹鋼組,抗菌不銹鋼組各時間點細胞毒性均為1級。
　　

6、流式細胞術實驗結果:各組細胞均以正常細胞和凋亡細胞為主,壞死細胞較少。凋亡細胞在各組間分布不均,普通不銹鋼和抗菌不銹鋼組的凋亡細胞多于空白對照組。細胞凋亡率在普通不銹鋼、抗菌不銹鋼組之間無統(tǒng)計學差異(P＞0.05),但這兩組的細胞凋亡率均高于空白對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 結論：
　　 抗菌不銹鋼材料對L-929細胞具有良好的生物相容性,與醫(yī)用普通不銹鋼材料的細胞毒性無統(tǒng)計學差異,符合口腔正畸材料的