晚期喉鱗癌患者術(shù)后的生存和預(yù)后分析及Satb2基因在喉鱗癌中作用的研究.pdf

1、第一部分(臨床部分)晚期喉鱗癌患者術(shù)后的生存和預(yù)后分析 背景與目的：目前晚期喉鱗癌患者的預(yù)后差，針對(duì)晚期喉癌預(yù)后的相關(guān)因素的研究結(jié)果差異較大。本研究旨在總結(jié)晚期喉癌的臨床特征和治療方法，探討影響晚期(Ⅲ～Ⅳ期)喉鱗狀細(xì)胞癌患者術(shù)后生存和預(yù)后的臨床病理因素。 方法：回顧性分析1990年1月至2003年12月間中山大學(xué)附屬腫瘤防治中心221例晚期喉鱗癌患者的臨床病理資料。應(yīng)用Kaplan—Meier法分析生存結(jié)果，通過Cox

2、回歸模型確立影響患者生存預(yù)后的獨(dú)立因素，并建立晚期喉鱗癌的預(yù)后模型。 結(jié)果：本組221例晚期喉鱗癌患者術(shù)后的平均生存時(shí)間為96.58個(gè)月，2年和5年無瘤生存率分別為60.0％和43.0％；2年和5年累積生存率分別為76.9％和51.1％。Ⅲ期喉癌的無瘤和累積生存率均高于Ⅳ期；術(shù)后放療可以提高切緣陽性患者的生存率；行部分喉切除術(shù)的患者的生存率與全喉切除術(shù)者相近。年齡、解剖分型、病理分期、手術(shù)切緣和放射治療為影響患者無瘤生存的獨(dú)立因

3、素；而年齡、病理分期和手術(shù)切緣是影響患者累積生存率的獨(dú)立因素。 結(jié)論：晚期喉鱗癌患者預(yù)后差，影響患者術(shù)后累積生存率的獨(dú)立因素為年齡、病理分期和手術(shù)切緣。 第二部分(基礎(chǔ)部分)Satb2基因在喉鱗癌中作用的研究第1章Satb2基因在喉鱗癌組織和正常組織中表達(dá)差異 目的：檢測(cè)Satb2基因在喉鱗癌組織和癌旁正常喉粘膜組織中的表達(dá)是否存在差異。 材料和方法：RT—PCR檢測(cè)satb2在正常喉粘膜組織、喉鱗癌組織

4、和人喉癌細(xì)胞株Hep2中mRNA水平的表達(dá)；WesternBlotting檢測(cè)satb2在正常喉粘膜組織、喉鱗癌組織和人喉癌細(xì)胞株Hep2中蛋白質(zhì)水平的表達(dá)。 結(jié)果：RT—PCR結(jié)果顯示，14例患者的中，satb2mRNA在正常組織中的表達(dá)量與其在癌組織中的表達(dá)量相近(P>0.05)。WesternBlotting顯示，11例患者中，satb2蛋白在癌旁組織中的表達(dá)量明顯高于其在癌組織中的表達(dá)量(11/14)；而3例患者的sat

5、b2蛋白在癌旁組織中的表達(dá)量與其癌組織中的表達(dá)量相等(3/14)。Satb2mRNA在人喉鱗癌Hep2細(xì)胞株中有mRNA水平的表達(dá)；Satb2蛋白在人喉鱗癌Hep2細(xì)胞株細(xì)胞株中的表達(dá)極低。 結(jié)論： 1.本步實(shí)驗(yàn)顯示，satb2mRNA在癌旁組織中的表達(dá)與其癌組織中的表達(dá)量相近； 2.Satb2蛋白在癌旁(正常)組織中的表達(dá)量明顯高于其在癌組織中的表達(dá)； 3.Satb2蛋白在喉鱗癌細(xì)胞株Hep2中的低表達(dá)

6、。 第2章Satb2在喉鱗癌組織中的表達(dá)及其對(duì)患者預(yù)后的影響 目的：檢測(cè)Satb2基因的在喉鱗癌組織中的蛋白表達(dá)水平及其對(duì)患者預(yù)后有影響。 材料和方法：本研究共收集了中山大學(xué)腫瘤防治中心1990年1月至2003年12月的86例以手術(shù)治療為主的患者的喉鱗癌組織，和15例癌旁組織(組織病理學(xué)顯示正常)。應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)satb2蛋白的表達(dá)情況。應(yīng)用Kaplan—Meier法進(jìn)行生存分析，通過Cox回歸模型確立

7、影響患者預(yù)后的獨(dú)立因素。 結(jié)果：本組患者的2年和5年累積生存率分別為80.2％和71.7％。Satb2蛋白在癌旁組織中的表達(dá)呈強(qiáng)陽性；satb2蛋白在喉鱗癌組織的表達(dá)：48例陽性或38例陰性；Satb2表達(dá)陽性組和陰性組的5年生存率分別為80.5％和52.4％，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。單因素分析得出影響生存率的有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義變量因素包括：年齡、侵犯雙側(cè)喉結(jié)構(gòu)、侵犯甲狀軟骨、分期、切緣狀態(tài)、腫瘤復(fù)發(fā)和satb2蛋白的表達(dá)情況等

8、。多因素分析顯示切緣狀態(tài)、腫瘤復(fù)發(fā)和satb2蛋白的表達(dá)情況是影響患者預(yù)后的獨(dú)立因素。 結(jié)論： 1.本步實(shí)驗(yàn)顯示，satb2蛋白表達(dá)陽性的患者預(yù)后較好； 2.Satb2蛋白的表達(dá)情況、腫瘤復(fù)發(fā)和手術(shù)切緣狀態(tài)是影響患者預(yù)后的獨(dú)立因素，satb2蛋白在喉癌組織中的表達(dá)水平與患者的預(yù)后相關(guān)。 第3章Satb2基因在喉鱗癌細(xì)胞中作用機(jī)制的研究(Satb2基因?qū)τ诤眵[癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移能力的影響) 目的：檢測(cè)

9、satb2基因高表達(dá)對(duì)喉鱗癌細(xì)胞株Hep2的細(xì)胞生物學(xué)特性的影響。 材料和方法：構(gòu)建轉(zhuǎn)染載體plncx2-satb2，轉(zhuǎn)染Hep2細(xì)胞，通過細(xì)胞生長(zhǎng)曲線測(cè)定(計(jì)數(shù)法)，平板克隆實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)，觀察satb2基因上調(diào)對(duì)喉鱗癌細(xì)胞株Hep2的增殖能力和侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響。 結(jié)果：本實(shí)驗(yàn)成功建立并篩選了高表達(dá)satb2的喉鱗癌細(xì)胞克隆。上調(diào)satb2基因的表達(dá)會(huì)明顯抑制Hep2細(xì)胞株的增殖能力；平板克隆實(shí)驗(yàn)表明，