siRNA沉默OPN基因治療喉鱗癌的實驗研究.pdf

1、目的：通過體外實驗和動物模型觀察OPN-siRNA對喉鱗癌的治療效應(yīng)，探索一條喉鱗癌基因治療的新途徑。 方法：OPN基因被OPN-siRNA沉默后，RT-PCR檢測OPNmRNA的表達(dá)水平；Western-blot檢測OPN蛋白質(zhì)的表達(dá)水平，PIStaining檢測凋亡細(xì)胞數(shù)目，MTT Assay檢測凋亡細(xì)胞水平；建立人喉鱗癌裸鼠種植瘤模型；裸鼠瘤體內(nèi)注射治療結(jié)束前后分別稱量裸鼠體重、離體腫瘤的重量和測量腫瘤體積大小。

2、結(jié)果：OPN基因被OPN-siRNA沉默后，western blot檢測Hep-2細(xì)胞的OPN基因剪切體1蛋白表達(dá)明顯減弱；RT-PCR技術(shù)檢測OPNmRNA表達(dá)量明顯降低。PI染料染色后，OPN-RNAi組30％-35％的腫瘤細(xì)胞凋亡；MTT Assay結(jié)果顯示，OPN-siRNA慢病毒轉(zhuǎn)染Hep2細(xì)胞后，Hep2細(xì)胞細(xì)胞活力明顯下降；腫瘤生長曲線可知，OPN-siRNA慢病毒轉(zhuǎn)染組的腫瘤生長明顯受到抑制；OPN-siRNA慢病毒轉(zhuǎn)染