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文檔簡介
1、第一部分文獻研究對苦參中的主要化學(xué)成分及藥理作用研究進行了綜述。 第二部分苦參黃酮部位與生物堿部位提取純化工藝 對苦參黃酮部位及生物堿部位提取工藝進行了研究。采用L<,9>(3<'4>)正交試驗,以總黃酮,總生物堿,以及主要有效成分或指標(biāo)性成分降苦參酮、苦參啶、三葉豆紫檀苷、氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿和槐果堿的提取量為考察指標(biāo),通過對提取溶劑、提取次數(shù)、提取時間、溶劑用量的考察,建立了苦參黃酮部位及生物堿部位最佳提取
2、工藝。即A<,2>%乙醇提取B<,3>次,每次提取C<,2>小時,溶劑用量為D<,2>倍量。 采用溶劑處理方法富集了苦參黃酮部位??鄥ⅫS酮部位制備方法為:苦參A<,2>%乙醇提取物加水分散(溶液濃度為30mg/mL),離心,殘渣加r5倍量J5%乙醇超聲溶解,離心,乙醇溶解液回收溶劑至無醇味,加s倍量x%HCl超聲溶解,離心,殘渣水洗中性,減壓干燥,即得苦參黃酮部位。 采用大孔樹脂純化方法分離優(yōu)化了苦參生物堿部位。通過對5
3、種不同大孔吸附樹脂的篩選,確定E型大孔吸附樹脂對總生物堿和氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿、槐果堿4種生物堿成分具有較好的吸附性能。 對苦參黃酮部位及生物堿部位提取工藝和純化工藝進行了驗證。3批樣品的制備和含量測定結(jié)果表明,苦參黃酮部位及生物堿部位提取純化工藝合理、穩(wěn)定。 第三部分苦參黃酮部位化學(xué)成分研究 采用多種分離純化方法和結(jié)構(gòu)鑒定手段(如UV、IR、EI-MS、ESI-MS、<'1>HNMR、<'13>CNM
4、R等波譜學(xué)技術(shù)和化學(xué)方法),對苦參黃酮部位化學(xué)成分進行了研究。共分離鑒定出12個黃酮類化合物,其中黃酮醇1個,為降脫水淫羊藿素;二氫黃酮4個,分別為苦參醇A、降苦參酮、苦參酮和異苦參酮;紫檀素類3個,分別為三葉豆紫檀苷、高麗槐素、三葉豆紫檀苷單乙酸酯;查爾酮2個,分別為苦參啶和黃腐醇;香豆苯醚1個,為苜蓿酚;異黃酮1個,為芒柄花素。其中苜蓿酚為首次從苦參中分離得到。 第四部分苦參黃酮部位及生物堿部位質(zhì)量控制方法研究 建立
5、了鹽酸-鎂粉比色法測定苦參黃酮部位中總黃酮含量的方法。采用鹽酸.鎂粉顯色反應(yīng),以降苦參酮為對照品,降苦參酮回歸方程為Y=0.0154 X+0.0001(r=0.9992),在8.27~41.36μg/mL范圍內(nèi)與吸光度成良好的線性關(guān)系。 建立了高效液相色譜法測定指標(biāo)性成分降苦參酮、3批苦參黃酮部位、3批苦參提取物和3批苦參藥材中降苦參酮、黃腐醇、苦參啶和三葉豆紫檀苷含量測定結(jié)果表明,該方法簡便、可靠,可作為苦參黃酮部位、苦參提取
6、物和苦參藥材中降苦參酮等4種成分的含量測定方法。 建立了高效液相色譜法測定指標(biāo)性成分氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿和槐果堿的含量的方法,氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿和槐果堿的回歸方程分別為:Y=1019192X+1630.3(r=0.9999),Y=1599822X+19713(r=0.9999),Y=1407124X+20031(r=0.9995),Y=3377452X-15677(r=0.9994),氧化苦參堿、氧化槐果堿
7、、苦參堿和槐果堿分別在0.202μg~1.213μg、0.220 μg~1.320μg、0.207μg~1.240μg、0.124μg~0.746μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿和槐果堿平均回收率分別為101.43%,99.08%,102.59%和102.06, RSD分別為1.30%,0.94%,1.69%和1.10%(n=6)。3批苦參生物堿部位、3批苦參提取物和3批苦參藥材中氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿和槐
8、果堿4種成分含量測定結(jié)果表明,該方法簡便、可靠,可作為苦參生物堿部位、苦參提取物和苦參藥材中氧化苦參堿等4種成分的含量測定方法。建立了苦參黃酮部位的HPLC指紋圖譜,作為控制其質(zhì)量的定性指標(biāo)。在320nm檢測波長下,得到31個指紋峰(或峰組),同時采用添加對照品指認(rèn)的方法對其中的11個指紋峰進行了化學(xué)成分的歸屬和確定。這11個指紋峰均為黃酮類成分,它們分別為峰1(三葉豆紫檀苷)、峰5(三葉豆紫檀苷單乙酸酯)、峰10(芒柄花素)、峰11(
9、高麗槐素)、峰14(苦參酮)、峰17(降脫水淫羊藿素)、峰22(降苦參酮)、峰25(黃腐醇)、峰28(異苦參酮)、峰30(苦參啶)和峰31(苦參醇A)。 采用HPLC法測定購自全國不同地區(qū)的25批市售苦參飲片中4種主要黃酮類成分三葉豆紫檀苷、降苦參酮、黃腐醇及苦參啶的含量,探討將其納入苦參藥材、飲片及其制劑質(zhì)量控制評價的必要性和可行性。25批苦參市售飲片中4種黃酮類成分的含量測定結(jié)果表明:三葉豆紫檀苷含量范圍為0.05%~0.3
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