黃瓜品種（材料）抗霜霉病鑒定、評(píng)價(jià)與基因定位研究.pdf

1、本文從黃瓜霜霉病菌的孢子囊萌發(fā)入手，研究與建立適于四川省域特點(diǎn)的接種、抗病性鑒定與評(píng)價(jià)方法等一套體系，并定位抗霜霉病基因，以期為抗病育種和生產(chǎn)服務(wù)。
　　在孢子囊萌發(fā)試驗(yàn)中，5％蔗糖懸浮液中的孢子囊萌發(fā)率顯著高于無糖懸浮液中的萌發(fā)率，表明在懸浮液中加入蔗糖可刺激孢子囊的萌發(fā)。低溫誘導(dǎo)可顯著提高孢子囊的萌發(fā)率。
　　將黃瓜霜霉病菌孢子囊懸浮液放置在-70℃和26℃處理5d的葉片病情指數(shù)顯著低于-20℃、-16℃、-6℃、-4℃

2、、-3℃、3℃、26℃和對(duì)照(26℃處理0h)的病情指數(shù)。表明低溫處理可保存霜霉病菌，但超低溫處理顯著降低了病情指數(shù);26℃溫度下處理5d與葉片組織的衰敗和雜菌叢生有關(guān)。
　　室內(nèi)活體試驗(yàn)中，以104個(gè)/mL孢子囊懸浮液在5℃低溫下處理2h噴霧接種7d后病情指數(shù)均高于其它7個(gè)處理;低溫誘導(dǎo)的懸浮液利于發(fā)病;噴霧接種效果優(yōu)于注射法和灌根法;104的接種濃度優(yōu)于103的接種濃度。
　　在室內(nèi)離體接種試驗(yàn)中，濃度以103個(gè)/mL孢

3、子囊懸浮液進(jìn)行離體葉片的接種，不同品種間就可體現(xiàn)出抗感差異，病情指數(shù)最大可達(dá)到60.00，發(fā)病較充分;葉片背面接種效果優(yōu)于正面接種，表明葉背面的侵染對(duì)于霜霉病菌是最經(jīng)濟(jì)、有效的途徑;兩種保存黃瓜葉片的基質(zhì)中，保綠培養(yǎng)基比濾紙做保濕基質(zhì)條件下的發(fā)病要充分，且簡潔、經(jīng)濟(jì);在5μg/L的濃度下，苯并咪唑可以起到保綠的作用，增加保綠時(shí)間，其保綠培養(yǎng)基上的霜霉病菌產(chǎn)孢多，利于快繁、保存和純化菌種;0.02％吐溫20配置的孢子懸浮液的接種效果優(yōu)于吐

4、溫80;在孢子囊懸浮液中加入少量的黃瓜花粉，可促進(jìn)霜霉病發(fā)生。
　　在田間，不同濃度中以104個(gè)孢子囊/ml的濃度為宜，采用噴霧較注射、灌根方法的接種效果好;室內(nèi)活體最優(yōu)的接種方法與田間相一致，均為噴霧接種法;但田間的接種濃度需高于室內(nèi)。
　　在大棚中，以5℃處理2h的孢子囊懸浮液接種的病情指數(shù)極顯著高于另兩種方法;材料7312、7296病情指數(shù)極顯著低于材料7307、7302、7308、7301，材料間抗病性差異明顯。

5、r>　　在露地中，以5℃處理2h的104個(gè)/ml孢子囊懸浮液進(jìn)行接種病指明顯高于對(duì)照;8個(gè)黃瓜材料的病情指數(shù)在8.55～77.06，抗感差異明顯。
　　在自然發(fā)病鑒定試驗(yàn)中，大多數(shù)材料在兩地的抗病趨勢(shì)一致，但材料1在兩地的抗病性表現(xiàn)差異較大，表明自然發(fā)病鑒定會(huì)受到自然環(huán)境因素的影響。所以，為鑒定準(zhǔn)確性和科學(xué)性，以5℃處理2h的104個(gè)/ml的孢子囊懸浮液，在田間人工接種參試品種或誘發(fā)品種進(jìn)行抗病性鑒定。
　　根據(jù)田間接種試驗(yàn)

6、，篩選出津研四號(hào)做為抗病對(duì)照品種，二早子做為感病對(duì)照品種，并應(yīng)用于抗性鑒定中。
　　對(duì)田間62個(gè)黃瓜品種（材料）的病情指數(shù)聚類分析，確定了抗性鑒定標(biāo)準(zhǔn)，即在感病對(duì)照品種的病情指數(shù)為34.06時(shí)，以病情指數(shù)為參對(duì)其他品種的抗感類型進(jìn)行劃分:高抗(HR)≤5，5＜抗病(R)≤13，13＜中抗(MR)＜19.5，19.5＜中感(MS)＜25，25＜感病(S)≤33.5，高感(HS)＞33.5。當(dāng)感病對(duì)照品種的病情指數(shù)大于等于34.06時(shí)

7、，表明發(fā)病達(dá)到充分。建立了矯正病情指數(shù)，并驗(yàn)證了其實(shí)用性。矯正病情指數(shù)=X年某參試品種（材料）病情指數(shù)/（X年二早子品種的病情指數(shù)/36.5）。利用矯正病情指數(shù)可便于不同年份間抗性品種的比對(duì)。
　　生產(chǎn)中抗性品種抗性喪失的三年監(jiān)測中，抗性品種喪失或減弱的比例為87.50％。在生產(chǎn)中，需注意抗性品種的輪換使用和加強(qiáng)抗性監(jiān)測和預(yù)警。
　　以常規(guī)黃瓜品種二早子（感，編號(hào)S）與材料8號(hào)的純化系（抗，編號(hào)R）雜交，R為父本，S為母本;