下丘腦視前區(qū)“針刺灌流液”對(duì)去卵巢大鼠整體和離體效應(yīng)的研究.pdf

1、目的：本文在去卵巢大鼠模型上，針刺處理一組特定穴位后，用推挽灌流技術(shù)收集下丘腦視前區(qū)(POA)的推挽灌流液(簡(jiǎn)稱(chēng)“針刺灌流液”)，并將其微量注射于另一個(gè)未經(jīng)針刺處理的去卵巢大鼠的下丘腦POA，或條件孵育的下丘腦腦片，觀察其是否可產(chǎn)生模擬的(針刺)效應(yīng)，以探討“針刺灌流液"是否可作為一種針刺信息的載體，將整體的特定針刺效應(yīng)轉(zhuǎn)移到離體培養(yǎng)的組織或細(xì)胞上，為研究針刺治療圍角經(jīng)期綜合征信號(hào)傳(轉(zhuǎn))導(dǎo)機(jī)制，提供一種可行的實(shí)驗(yàn)新方法。 材料

2、和方法：采用切除雙側(cè)卵巢導(dǎo)致下丘腦．垂體．卵巢軸(HPOA)功能異常的大鼠模型。將SD大鼠隨機(jī)分成收集灌流液組和注射灌流液組兩大組。收集灌流液組又分為收集“針刺灌流液”組(OVXAP)和去卵巢大鼠POA灌流液組(OVXP)；OVXAP連續(xù)三天給予電針“關(guān)元”為主的一組穴位處理，以陰道脫落細(xì)胞重新出現(xiàn)作為電針有效的標(biāo)志；RIA測(cè)定針刺后動(dòng)物血E2水平，HPLC測(cè)定灌流液中的單胺類(lèi)和氨基酸遞質(zhì)以及D一內(nèi)啡肽的含量，對(duì)“針刺灌流液”進(jìn)行質(zhì)量控

3、制；OVXP的灌流液收集方法同OVXAP，但不給予針刺處理。注射灌流液組再分為注射“針刺灌流液”組(IOVXAP)、注射灌流液對(duì)照組(IOVXP)和注射人工腦脊液對(duì)照組(IaCSF)。注射前后分別作陰道涂片，進(jìn)行脫落細(xì)胞學(xué)檢查，以確定是否出現(xiàn)針刺樣效應(yīng)；在加入不同劑量的“針刺灌流液”條件下，作下丘腦腦片的條件孵育，以觀察“針刺灌流液”對(duì)腦片分泌GnRH的影響，進(jìn)一步確定“針刺灌流液”在離體組織上是否能模擬特定針刺的作用。 結(jié)果：

4、以“針刺灌流液”中B．內(nèi)啡肽、DA、GABA、5-HT和Glu這五個(gè)主要影響GnRH釋放的神經(jīng)遞質(zhì)的檢測(cè)均值作為初步質(zhì)量控制的指標(biāo)，用達(dá)到質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)的“針刺灌流液”下丘腦POA核團(tuán)微量注射去卵巢大鼠，以去卵巢大鼠血E2顯著升高作為“針刺灌流液”有效的標(biāo)志?！搬槾坦嗔饕骸敝笑?內(nèi)啡肽、DA、GABA、5-HT以及Glu的均值分別為：17．69±1.96pmol/L，20.9±3.43nmol/L，218．83±46.74ng/ml，8．72

5、±3.55，129．73±30．34ng/m1。對(duì)所收集的“針刺灌流液”進(jìn)行檢測(cè)，這四個(gè)指標(biāo)未達(dá)均值的舍棄不用?！搬槾坦嗔饕骸蔽⒘孔⑸溆谌ヂ殉泊笫驪OA的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，IOVXAP血E2顯著高于IOVXP和IaCSF(P<0．05)，且IOVXAP陰道涂片出現(xiàn)大量成熟脫落細(xì)胞，與IOVXP和IaCSF相比，存在顯著差異；用“針刺灌流液”條件孵育去卵巢大鼠下丘腦腦片的結(jié)果顯示，下丘腦腦片釋放GnRH受到明顯抑制，與加入IOVXP和IaCS