被動吸煙兒童頭發(fā)尼古丁含量測定及其應用.pdf

1、被動吸煙，或稱環(huán)境煙草煙霧(environmental tobacco smoke，ETS)暴露，是指不吸煙者吸入吸煙者呼出的香煙煙霧，它是室內(nèi)環(huán)境危險暴露之一。據(jù)我國對51萬人吸煙情況的抽樣調(diào)查，被動吸煙危害人數(shù)達40％，受害場地：一是家庭，二是公共場所。ETS和癌癥、心血管疾病以及呼吸道感染等發(fā)病率密切相關。長期暴露于香煙煙霧可引起肺癌以及鼻竇癌、子宮頸癌、乳腺癌和膀胱癌。此外，香煙中的苯、鉛、錳和PAH等多種有害物質(zhì)還可對女性生殖

2、系統(tǒng)產(chǎn)生損害作用。 香煙煙霧的主要受害者是兒童及青少年。暴露于香煙煙霧的被動吸煙可能導致某些小兒疾病日益增多，如支氣管炎及肺發(fā)育不良、呼吸道感染、肺功能減低、哮喘、兒童癌癥、中耳炎等，父母吸煙者其子女在兒童期呼吸道癥狀和呼吸功能的改變明顯高于無吸煙者。一些研究顯示被動吸煙可增加嬰兒猝死綜合征、早產(chǎn)、低出生體重兒的發(fā)生。其它與香煙煙霧有關的健康問題有兒童認知與行為異常等，被動吸煙會影響兒童智力，并導致行為問題，有資料表明母親在懷孕

3、期間吸煙的兒童出現(xiàn)行為問題的幾率比那些母親在懷孕期間不吸煙的兒童要高得多。 在很多有關ETS暴露的流行病學研究中，ETS暴露與否主要通過調(diào)查問卷來判定，因此影響評價結果的可靠性。采用較為客觀的實驗室測量指標來保證調(diào)查結果的真實有效是必要的。在一系列有關ETS暴露的評價指標中，現(xiàn)在較為廣泛使用測定體液(血液、唾液、尿)中可鐵寧(cotinine)的濃度來進行評價。Cotinine是人體吸入煙草煙霧中尼古丁后經(jīng)肝臟時其吡咯烷環(huán)被氧化

4、的主要代謝產(chǎn)物，是判定被動吸煙比較客觀而又特異的實驗室指標。由于體液中可鐵寧的半衰期較短，只可用來測量數(shù)天內(nèi)ETS的累積暴露量，而頭發(fā)中尼古丁含量的分析可提供較長時間(甚至數(shù)月)內(nèi)暴露于ETS的信息，因為頭發(fā)的平均生長速度為1厘米／月左右。 頭發(fā)中尼古丁含量的測定國外采用放射免疫法(RIA)、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(GC-MS)和高效液相色譜-電化學檢測(HPLC-ECD)等方法。放射免疫法(RIA)需要使用兩種放射性同位素<'

5、125>I和<'3>H，盡管放射免疫法易于操作，但采用放射免疫法測定的結果比采用色譜法的結果高出30～50％，原因是由于與尼古丁其它的代謝物交叉反應而使測定結果偏高，產(chǎn)生的大量放射性廢液的處理也是一個令人關心的問題。色譜法技術特異性好且靈敏度高，可以同時測定頭發(fā)中的尼古丁和可鐵寧，與放射免疫法相比，色譜法不易受其它因素的影響。國外普遍采用濃NaOH和混合溶劑提取或用溶劑反復提取的方法，采用氣相色譜分離，然后用質(zhì)譜儀進行檢測。由于質(zhì)譜儀的

6、成本較高，我國基層單位的氣相色譜儀一般不配備此檢測器。高效液相色譜法洗脫時間較長，且使用對人體有毒有害的有機溶劑，并易對環(huán)境造成污染。因此，建立一種快速、靈敏、特異的測定被動吸煙者頭發(fā)中尼古丁含量的方法就具有現(xiàn)實的意義。 研究目的 1、檢測兒童被動吸煙狀況下發(fā)樣中尼古丁含量反映其內(nèi)暴露量 2、建立GC／FID測定被動吸煙兒童頭發(fā)中尼古丁的定性、定量分析方法及應用該方法測定頭發(fā)樣本的尼古丁含量 3、 實驗室

7、檢測結果與問卷調(diào)查反映的健康效應進行相關性分析 研究方法隨機抽取廣州市兩所小學共530名小學生(9～12歲)作為研究對象，采用統(tǒng)一的調(diào)查問卷，包括學生問卷和家長問卷，其中家長問卷由主卷和確認書組成，同時對其家長在確認書上表示同意采集頭發(fā)和血樣并簽字的學生進行頭發(fā)樣本及血樣的采集。調(diào)查項目包括兒童的一般情況、有關父母及家人的吸煙行為、被動吸煙對兒童健康的影響等，并對兒童進行血清免疫學指標和頭發(fā)尼古丁含量的測定。血清免疫球蛋白IgE

8、和細胞因子IL-8的濃度分別用晶美生物工程(北京)有限公司生產(chǎn)的人IgE ELISA試劑盒和人IL-8 ELISA試劑盒進行測定。頭發(fā)樣本剪碎后用3ml 3mol／LNaOH溶液，于80℃水浴1小時水解后，加入喹啉作為內(nèi)標物質(zhì)，用乙醚直接提取兩次后，在45℃水浴下氮氣吹干后用20 μl甲醇重新溶解殘留物經(jīng)Rtx-5毛細管柱分離，火焰離子化檢測器檢測尼古丁含量。根據(jù)WH0對被動吸煙的定義，把符合條件的作為被動吸煙暴露組，其余的為非暴露組，

9、而兒童被動吸煙的暴露情況以及暴露量可通過調(diào)查問卷來確認。采用卡方檢驗對實驗室檢測方法結果和問卷調(diào)查方法結果進行一致性分析。 研究結果 本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)兒童被動吸煙率為35.6％，兒童ETS暴露場所主要是在家庭，而且主要來自父親吸煙，大部分兒童在家人吸煙時會采取不同的回避措施。被動吸煙組兒童的血清IgE含量顯著高于非被動吸煙組，而其IL-8含量則明顯比非被動吸煙組低。調(diào)查結果還沒有證據(jù)表明受到ETS暴露的兒童的呼吸道疾病的發(fā)生

10、率比沒有受到ETS暴露的兒童要高。 建立了GC／FID測定兒童頭發(fā)中尼古丁的定性、定量分析方法，該檢測方法尼古丁的回收率在87.4％～100.4％之間，最低檢出限為0.1 μg／mL。本實驗共測定了112例兒童頭發(fā)樣品(包括有環(huán)境煙草煙霧暴露和沒有環(huán)境煙草煙霧暴露)，其中有環(huán)境煙草煙霧暴露兒童頭發(fā)尼古丁濃度中位數(shù)為2.668ng／mg；沒有環(huán)境煙草煙霧暴露兒童頭發(fā)尼古丁濃度中位數(shù)為0.357ng／mg，經(jīng)統(tǒng)計學分析，兩者之間的差

11、異有統(tǒng)計學意義。對與暴露組兒童相對應的家長問卷中有關吸煙情況進行分析，根據(jù)調(diào)查問卷中有關家人每天吸煙數(shù)量，把暴露組分為低暴露組(<10支／天)(n=21)、中強度暴露組(10～20支／天)(n=29)、高暴露組(>20支／天)(n=12)三組。低暴露量(<10支／天)組與中強度暴露量(10～20支／天)組之間兒童頭發(fā)尼古丁含量差別沒有統(tǒng)計學意義，但這兩組均與高暴露量(>20支／天)組之間兒童頭發(fā)尼古丁差別有統(tǒng)計學意義。結果表明，監(jiān)測兒童

12、頭發(fā)中的尼古丁含量在一定程度上反映了其環(huán)境煙草煙霧暴露量。頭發(fā)中尼古丁檢測結果和問卷調(diào)查中的ETS暴露量有較好的一致性，Kappa=O.621，本次問卷調(diào)查結果基本上反映了兒童被動吸煙的情況。 結論 1、兒童被動吸煙率為35.6％，兒童ETS暴露場所主要是在家庭，而且主要來自父親吸煙，大部分兒童在家人吸煙時會采取不同的回避措施。被動吸煙組兒童的血清IgE含量顯著高于非被動吸煙組，而其IL-8含量則明顯比非被動吸煙組低。調(diào)