淫羊藿黃酮對(duì)被動(dòng)吸煙誘導(dǎo)骨吸收的防治及其作用機(jī)理的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一章淫羊藿黃酮對(duì)被動(dòng)吸煙大鼠骨量、骨生物力學(xué)、骨形態(tài)學(xué)與骨代謝生化指標(biāo)的影響 第一部分淫羊藿黃酮對(duì)被動(dòng)吸煙大鼠骨量的影響 目的：探討淫羊藿黃酮干預(yù)對(duì)被動(dòng)吸煙大鼠骨量的影響。 方法：分組：選用2月齡Sprague-Dawley(SD)大鼠60只，隨機(jī)分為6組，每組10只，各組雌雄各半，雌雄分籠飼養(yǎng)。A組：空白對(duì)照組，常規(guī)方法飼養(yǎng)，不給予被動(dòng)吸煙；B組：被動(dòng)吸煙組，不給予灌服藥物；C組：被動(dòng)吸煙+鈣組，灌服高效鈣(

2、75mg．kg<'-1>·d<'-1>)+維生素D<,3> 21 IU kg<'-1>d<'-1>；D組：被動(dòng)吸煙+低劑量，灌服淫羊藿黃酮(75mg·kg<'-1>·d<'-1>)；E組：被動(dòng)吸煙+中劑量，灌服淫羊藿黃酮(150mg·kg<'-1>·d<'-1>)；F組：被動(dòng)吸煙+高劑量，灌服淫羊藿黃酮(300mg·kg<'-1>·d<'-1>)。按“密室熏煙法"給予實(shí)驗(yàn)組(B組、C組、D組、E組、F組、)大鼠被動(dòng)吸煙4個(gè)月。實(shí)驗(yàn)第4月

3、末處死大鼠，取出大鼠雙側(cè)脛骨、雙側(cè)股骨、雙側(cè)肱骨和全部腰椎，測(cè)定雙側(cè)股骨、雙側(cè)脛骨、雙側(cè)肱骨和全部腰椎骨密度。 結(jié)論：淫羊藿黃酮可有效防治被動(dòng)吸煙誘導(dǎo)的大鼠骨密度值的降低，使大鼠骨密度維持于較高水平。 第二部分淫羊藿黃酮對(duì)被動(dòng)吸煙大鼠骨生物力學(xué)的影響 目的：探討淫羊藿黃酮干預(yù)對(duì)被動(dòng)吸煙大鼠骨生物力學(xué)性能的影響。 方法：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物干預(yù)完畢后測(cè)定：(1)第四腰椎體力學(xué)性能指標(biāo)中彈性模量、最大載荷、最大應(yīng)力、變形

4、位能、結(jié)構(gòu)剛度；(2)股骨結(jié)構(gòu)力學(xué)性能指標(biāo)中最大載荷、破壞載荷、變形位能、結(jié)構(gòu)剛度；(3)股骨材料力學(xué)性能指標(biāo)中彈性模量、最大應(yīng)力、最大應(yīng)變、破壞應(yīng)力、破壞應(yīng)變。 結(jié)論：淫羊藿黃酮可有效防治被動(dòng)吸煙誘導(dǎo)的大鼠骨生物力學(xué)性能的降低，使其維持于較高水平。 第三部分淫羊藿黃酮對(duì)被動(dòng)吸煙大鼠骨形態(tài)學(xué)的影響 目的：探討淫羊藿黃酮干預(yù)對(duì)被動(dòng)吸煙大鼠骨形態(tài)學(xué)的影響。 方法：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在處死前14、13d和4、3d分別皮下

5、注射四環(huán)素和鈣黃綠素作體內(nèi)熒光標(biāo)記，干預(yù)完畢后測(cè)定或觀察：(1)脛骨上段松質(zhì)骨骨形態(tài)計(jì)量學(xué)靜態(tài)指標(biāo)中骨小梁面積百分?jǐn)?shù)、骨小梁厚度、骨小梁數(shù)目、骨小梁分離度；(2)脛骨上段松質(zhì)骨成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞計(jì)數(shù)；(3)股骨頭掃描電鏡形態(tài)分析指標(biāo)中骨小梁拱橋結(jié)構(gòu)、骨表面形態(tài)、骨小梁平均直徑、骨面積百分比。 結(jié)論：淫羊藿黃酮可有效防治被動(dòng)吸煙誘導(dǎo)的大鼠骨形態(tài)學(xué)性能的降低，使其維持于較高水平。 第四部分 淫羊藿黃酮對(duì)被動(dòng)

6、吸煙大鼠骨代謝生化指標(biāo)的影響 目的：探討淫羊藿黃酮干預(yù)對(duì)被動(dòng)吸煙大鼠骨代謝生化指標(biāo)的影響。 方法：每周測(cè)定大鼠體重；在實(shí)驗(yàn)第8周時(shí)用代謝籠收集24小時(shí)尿液，斷尾尾靜脈放血。實(shí)驗(yàn)第4月末，處死大鼠前一天用代謝籠收集24小時(shí)尿液，處死大鼠后心腔內(nèi)抽血，測(cè)定： (1)體重隨時(shí)間增長(zhǎng)情況；(2)臟／體比值指標(biāo)中肝、脾、腎、子宮、卵巢重量；(3)股骨骨鈣含量、骨磷含量、骨礦物質(zhì)含量；(4)血清骨鈣素和抗酒石酸酸性磷酸酶及尿脫氧吡

7、啶啉：(5)在第8周時(shí)血Ca、血P、血ALP、尿Ca、尿P、尿Hop；(6)在第4月末時(shí)血Ca、血P、血ALP、尿Ca、尿P、尿Hop。 結(jié)論：淫羊藿黃酮可有效防治被動(dòng)吸煙誘導(dǎo)的大鼠骨代謝生化指標(biāo)的惡化，使其維持于較正常的水平。 第二章淫羊藿黃酮對(duì)被動(dòng)吸煙大鼠骨組織腫瘤壞死因子和白介素1表達(dá)的影響及其相關(guān)性 目的：探討淫羊藿黃酮防治被動(dòng)吸煙大鼠骨質(zhì)疏松的可能分子機(jī)理。 方法：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物干預(yù)完畢后取出脛骨，制

8、備標(biāo)本，RT-PCR法檢測(cè)RNFmRNA和IL-1mRNA表達(dá)，并應(yīng)用曲線擬合分析其相關(guān)性。 結(jié)論：淫羊藿黃酮可抑制被動(dòng)吸煙大鼠骨組織TNF和IL-1 mRNA的表達(dá)，可能是其防治骨質(zhì)疏松的分子機(jī)理之一。 第三章淫羊藿黃酮對(duì)被動(dòng)吸煙大鼠骨組織骨橋蛋白表達(dá)的影響 目的:進(jìn)一步探討淫羊藿黃酮防治被動(dòng)吸煙大鼠骨質(zhì)疏松的可能分子機(jī)理。 方法:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物干預(yù)完畢后取出脛骨,制備標(biāo)本,RT-PCR法檢測(cè)OPN mRNA