Skp2和P27蛋白與卵巢腫瘤關(guān)系的研究.pdf

1、目的：(1)研究S期激酶相關(guān)蛋白(Skp2)及抑癌基因p27表達(dá)的蛋白在卵巢上皮性癌組織中的表達(dá)情況及其與卵巢癌臨床病理特征的關(guān)系。(2)探討1，25-二羥維生素D3(1，25(OH)2D3)與順鉑對人卵巢癌細(xì)胞株H08910的增殖抑制情況，并測定二者作用下細(xì)胞周期分布、Skp2及P27蛋白表達(dá)情況，進(jìn)一步探討它們的作用機(jī)制。 方法：(1)用免疫組織化學(xué)方法測定卵巢漿液性囊腺癌、交界性漿液性囊腺瘤、漿液性囊腺瘤和正常卵巢組織中S

2、kp2及P27蛋白表達(dá)情況。(2)采用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)及四唑鹽(MTT)比色法測定不同濃度1，25(OH)2D3與順鉑對人卵巢癌細(xì)胞株H08910作用不同時(shí)間后細(xì)胞增殖情況。(3)用流式細(xì)胞儀測定、分析1，25(OH)2D3與順鉑對該細(xì)胞株細(xì)胞周期的影響。(4)采用免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)檢測1，25(OH)2D3與順鉑作用后Skp2及P27蛋白表達(dá)情況。 結(jié)果：(1)Skp2在卵巢交界性漿液性囊腺瘤、漿液性囊腺瘤及正常卵巢組織中的表達(dá)均為

3、陰性，而在漿液性囊腺癌中較之增高，在低分化組、Ⅲ/Ⅳ期組及有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組分別高于高中分化組(P＜0.05)、Ⅰ/Ⅱ期組(P＜0.05)及無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(P＜0.01)。P27蛋白在卵巢漿液性囊腺癌中表達(dá)顯著低于卵巢漿液性囊腺瘤及正常卵巢組織中的表達(dá)(P＜0.01)，其與Skp2在卵巢漿液性囊腺癌中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05)。二者在不同年齡的卵巢癌中表達(dá)的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(2)MTT比色法測定結(jié)果顯示：1，25(OH)2D3在160

4、×10-9 mol/L以上時(shí)，對該細(xì)胞株的增殖有抑制作用(P＜0.05)；1,25(OH)2D3與順鉑聯(lián)合用時(shí)有協(xié)同作用，1，25(OH)2D3增強(qiáng)了順鉑抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用。(3)流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞周期分析顯示：與對照組(未用藥)相比，1，25(OH)2D3和順鉑作用48h后G0/G1期細(xì)胞增多(P＜0.01)，S、G2/M期細(xì)胞比例降低，細(xì)胞增殖指數(shù)降低(P＜0.01)。(4)采用免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測顯示1，25(OH)2D3和順

5、鉑作用下的細(xì)胞較對照組Skp2表達(dá)降低、P27蛋白表達(dá)增加(P＜0.01)。 結(jié)論：(1)Skp2在卵巢漿液性囊腺癌中表達(dá)增高，與卵巢癌的臨床分期、組織學(xué)分級成正相關(guān)，而P27蛋白則在卵巢漿液性囊腺癌中表達(dá)降低，二者在卵巢漿液性囊腺癌中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。Skp2與P27蛋白的表達(dá)異?？赡芘c卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切。(2)1，25(OH)2D3和順鉑對人卵巢癌細(xì)胞株HO8910均有抑制作用，而且1，25(OH)2D3有加強(qiáng)順鉑抑制